胰腺分泌应激蛋白PSP/reg逆转胰腺纤维化的实验研究

慢性胰腺炎（CP）是胰腺癌前期病变，其增加胰腺癌发病危险高达10～20倍，国内外尚无理想治疗方法。CP主要病理特征是胰腺纤维化。胰腺星状细胞（PSC）活化是纤维化发生发展的关键环节。最近研究表明，胰腺纤维化早期是动态可逆的，抑制PSC活化对胰腺纤维化的逆转具有十分重要的意义。我们前期工作发现，胰腺损伤早期，腺泡细胞分泌应激蛋白（PSP/reg）水平显著升高，抑制PSC的活化增殖，这可能与胰腺的自我保护有关。本研究拟在前期工作基础上，用基因重组的PSP/reg对体外培养活化的PSC及胰腺纤维化大鼠进行干预，观察其对PSC迁移、凋亡及PSC合成功能的影响；检测胰腺纤维化大鼠I型胶原的含量变化，探讨PSP/reg对PSC活性的调节及其涉及的信号传导途径，以阐明PSP/reg在胰腺损伤后纤维化过程的作用机制，探寻早期逆转胰腺纤维化的策略，为临床有效防治慢性胰腺炎提供新思路。

近年来，国内外学者一致认为胰腺星状细胞(pancreatic stellate cell, PSC)活化是纤维化形成的中心环节，以PSC为靶标的治疗逐渐成为抗纤维化的重要手段。本课题组与德国著名胰腺中心合作，首先从慢性胰腺炎患者纤维化区，外植体技术成功分离和培养人PSC，为进一步开展胰腺纤维化的基础和转化研究奠定坚实的工作基础。. 急、慢性胰腺损伤时，胰腺分泌胰石蛋白/再生蛋白 (pancreatic stone protein / regenerating protein, PSP/reg) 呈缓慢而持久的升高，具体机制不明。本课题组利用基因重组纯化的PSP/reg 作用于PSC，证实PSP/reg 呈剂量依赖性地抑制PSC增殖和迁移，提示PSP/reg在胰腺损伤后组织再生重构过程中发挥作用。PSP/reg不仅抑制PSC活性，且降低细胞外基质成分(extracellular matrix, ECM)生成沉积，从而减少纤维化的发生，进一步支持PSP/reg可能在胰腺损伤修复过程中起保护作用。课题组研究发现，体外培养活化的PSC不仅是ECM的主要来源，同时也产生能降解ECM的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)MMP1、2、9, MT1-MMP及其组织抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinases, TIMPs)TIMP1,2，并首次报道了PSC细胞膜表面的新型MMPs抑制剂RECK，在胰腺纤维化的ECM代谢失衡中发挥重要作用。PSP/reg降低上清中TIMPs/MMPs比值，减少胞膜表面RECK表达，解除TIMPs及RECK对MMPs的抑制，增强了MMPs的水解活性，促进胰腺损伤恢复期ECM吸收消散，从而推动了胰腺纤维化的逆转；涉及的信号通路有MAPKs (ERK,JNK,p38) 和PI3K/Akt。. 课题成果在SCI杂志《Pancreatology》和《European J Clinical Investigation》发表，2012年获青年-面上项目连续资助。课题组与德国、瑞士、美国等国际一流大学合作，将进一步拓展逆转胰腺纤维化的相关研究。研究成果将为防治胰腺炎、胰腺癌纤维化，以及糖尿病胰岛纤维化提供新靶点，开拓新思路，具有重大潜在的社会和经济效益。