虫草素对DC细胞NF-KB信号传导的影响和在移植免疫调节中的机制研究

DC是目前认为最强的抗原提呈细胞，研究认为DC细胞在移植免疫和免疫耐受中起到关键作用。而NF-KB信号传导途径在炎症反应、细胞增殖和分化方面有着关键的作用；中药抑制移植排斥反应是目前研究的热点之一，但其在移植免疫中的具体作用机制尚不清楚。结合前期我们对虫草素的研究成果和国内外学者的结论，本项目在既往虫草素对淋巴细胞作用的研究基础上，拟在体内、外采取先进的检测方法（FCM、ELISH等）和移植免疫研究相关模型（MLR、Renal Tx）在多层面、深层次上探讨虫草素对DC细胞功能、凋亡、细胞膜表面分子（CD80、CD86、MHC-II等）表达等影响及对移植物保护的作用机理研究，以虫草素通过NF-KB信号传导途径影响DC细胞的成熟状态，诱导T细胞生成Treg为主线，以期阐明虫草素在移植免疫中的作用和机理。为今后其在器官移植和自身免疫疾病中的应用及其它药理作用的研究奠定理论基础和实验依据。

本研究首先探索出虫草素在80μg/ml时对T细胞的增殖、分化和DC细胞的诱导均具有较好的作用；建立全新的耐受性DCs的诱导方案，即利用我国传统的中草药提纯成分虫草素诱导致耐受性DCs，采用这种方法成功培养出低表达OX62，MHC-II和CD86表面分子的耐受性DCs。并且这种DCs在促成熟剂LPS存在的培养环境下，通过抑致NF-κB 信号传导途径，降低共刺激分子表达及改变细胞因子分泌谱，维持DCs致耐受表型；功能方面，虫草素诱导的致耐受DCs具有在体内、体外诱导产生Tregs的能力，这些Tregs表达Foxp3水平较高，且这些Tregs在功能上具有明确的免疫抑制能力；成功建立大鼠肾脏移植模型；并在此免疫模型的基础上进行异体皮肤移植，移植前过继一定数量的供体来源的I致耐受性DCs可明显的延长移植物存活的时间，减轻针对移植物的排斥反应。为完善DCs在移植免疫中的作用提供有价值的基础平台，为临床应用DCs诱导特异性免疫耐受做出有益的探索，初步阐明了虫草素在移植免疫中的作用和机理，为今后指导其在器官移植中的应用奠定了研究基础。