西红花苷和花青素的提取分离及协同保护视网膜作用的研究

视网膜退行性病变是社会老龄化进程中发病率很高的眼科疾病，是中老年失明的主要原因,近几年，寻找能保护视网膜免受包括可见光在内的各种过氧化损伤的天然产物被认为是探索治疗这类眼科疾病的有效途径之一。本课题针对近年来文献报道西红花苷潜在的视网膜保护功能，以及西红花苷、花青素和叶黄素在视网膜保护机理研究方面显示出的各自独特的作用靶点。根据申请人探索及掌握的西红花苷和花青素纯品大量制备的经验和技术，首先从栀子和兔眼蓝莓中提取分离各种结构的西红花苷及花青素单体，然后将分离得到的天然产物与另一个视网膜保护明确的化合物叶黄素，以不同剂量采取二联或三联配伍，在培养细胞和动物两个水平上测试以上三类成分采取二联或三联配伍后是否表现出强于单独用药组的视网膜保护活性。以上研究得到的结果可以为西红花苷和花青素联合使用在视网膜保护功能方面提供最基础的研究数据，为今后潜在西红花苷复方视网膜保护功能食品的开发提供参考。

承担本项目4年来，课题组按照计划采用色谱技术从包括栀子和蓝莓在内的数个天然草本中分离纯化出不同结构天然产物单体，并主要对栀子提取物、栀子苷及西红花苷单体的肝脏药理活性，帕金森病体内药理，以及肾纤维化疾病药理进行了较为深入的研究。化合物色谱纯化工作中，我们对逆流色谱条件进行细致的工艺优化，摸索出最佳分离条件，从栀子、蓝莓、石仙桃和宾川乌头等药材中制备纯化出这几个药材中的主要化学成分，为这一系列中药成分有效成分的快速纯化提供了技术保障。.在肝脏药理活性研究中，采用小鼠CCl4肝损伤模型对比研究栀子西红花苷和栀子苷的肝保护生物活性，给药后测定了肝脏代谢酶ALT，AST，ALP，以及抗氧化活性指标GSH，SOD和CAT，结果显示以上成分均不同程度改善小鼠肝损伤程度，病理切片也显示显著的肝保护活性。研究数据在国内外第一次提示在栀子提取物抗肝炎活性的质量评价中，栀子苷和西红花苷可能都是重要的指标成分，应该同时考虑两类成分的含量。.帕金森病体内药理活性研究中，行为学数据(转杆实验、爬杆实验、拉力实验)，免疫组化检测黑质神经元TH阳性神经元测定结果，酶联接免疫吸附剂测定（IL-6、IL-1β、TNF-α和DAO）均表明栀子提取物各给药组治疗给药后，小鼠的行为学障碍及其它生化指标均获得显著改善。肾纤维化药理活性实验中，大鼠肾组织病理检测，肾组织免疫组化和Western Blot分析 (HIF-1α、VEGF、TGF-β、CTGF、E-cadherin和α-SMA)也显示栀子提取物具有显著的肾纤维化的保护作用。以上药理研究在不同水平上阐明了栀子提取物及单体化合物具有的生物活性，为栀子药效物质基础及临床应用提供了详实的数据。.同时，我们还研究了西南地区资源品种，包括石仙桃、蓝莓、棠梨、宾川乌头、杜仲叶和沙棘，获得了这些资源品种有意义的科学发现。总体上，本课题围绕栀子等中药品种药效物质基础进行深入的探索，获得了丰富的数据。研究共发表论文15篇，其中SCI收录10篇，均标注了本基金号(21162046)。