A2A受体拮抗剂对大鼠低氧状态下视网膜Müller细胞谷氨酰胺合成酶、谷氨酸转运体的调控作用及其信号通路探讨

Retinal diseases，as a cause of visual impairment and blindness.,has been received an extensive attention.Müller cells, the major glial cells of retina, provide functional and structural support to the retinal neurons. Müller cells play an important role in keeping the extracellular levels of neurotransmitters low and regulating synaptic transmission, such as glutamate. Glutamate is the primary chemical signal in retina.However,excessive stimulation by glutamate results in neuronal injury and degeneration.The metabolism and clearance of glutamate is mainly dependent on the glutamate - glutamine cycle.GS,GLAST of Müller cells are the key protein of the cycle.In recent years, the A2AR antagonist has been viewed as an attractive option to improve the treatment of neurological disorders. In our previous research, we also founded the A2AR antagonist could up-regulate the expression of GS、GLAST mRNA at elevated hydrostatic pressure and under hypoxic conditions. On basis of the previous achievement,we plan to consummate the study of the regulation mechanism of A2AR antagonist on GS,GLAST of Müller cells, and research the signal pathway furtherly.

视网膜疾病作为当前视力障碍和致盲的主要原因受到广泛关注。缺氧缺血贯穿疾病发生发展的全过程。Müller细胞是视网膜主要的胶质细胞,维持着视网膜的正常结构和生理功能。谷氨酸是视网膜上一种重要的兴奋性神经递质。但高浓度谷氨酸的聚集具有细胞毒性作用。谷氨酸的代谢和清除主要依赖于谷氨酸-谷氨酰胺循环。Müller细胞在谷氨酸-谷氨酰胺循环中发挥着核心作用，Müller细胞的GS,GLAST是其循环中重要的调节蛋白。以往研究发现: A2AR 拮抗剂在中枢神经系统疾病中具有神经保护作用。我们前期研究也证实：在高静水压和低氧大鼠体外模型中，A2AR拮抗剂可上调Müller细胞GS,GLAST mRNA的表达。本课题在前期研究的基础上，拟进行离体和在体实验，明确A2AR 拮抗剂对低氧状态下视网膜Müller 细胞GS,GLAST表达的调控作用，并进一步探讨其信号通路情况。

视网膜疾病作为当前视力障碍和致盲的主要原因受到广泛关注。缺氧缺血贯穿疾病发生发展的全过程。Müller细胞是视网膜主要的胶质细胞,维持着视网膜的正常结构和生理功能。谷氨酸是视网膜上一种重要的兴奋性神经递质。但高浓度谷氨酸的聚集具有细胞毒性作用。谷氨酸的代谢和清除主要依赖于谷氨酸-谷氨酰胺循环。Müller细胞在谷氨酸-谷氨酰胺循环中发挥着核心作用，Müller细胞的GS,GLAST是其循环中重要的调节蛋白。以往研究发现: A2AR 拮抗剂（SCH442416）在中枢神经系统疾病中具有神经保护作用。我们前期研究也证实：在高静水压和低氧大鼠体外模型中，SCH442416可上调Müller细胞GS,GLAST mRNA的表达。本课题在前期研究的基础上，拟进行离体和在体实验，明确SCH442416对低氧状态下视网膜Müller 细胞GS,GLAST表达的调控作用。通过细胞实验，我们发现：1.低氧培养24小时，Müller细胞的GS,GLAST表达升高。2,1UM SCH442416,可诱导Müller细胞的GS,GLAST表达进一步升高。3低氧可导Müller细胞细胞活性升高， SCH442416可诱导Müller细胞细胞活性升高。通过动物实验我们发现：大鼠玻璃体腔注射1UM SCH442416，视网膜Müller 的GS,GLAST的表达随着天数的增加而增加。3.将使用PAMAM包裹 SCH442416制备成纳米滴眼液并进行药学检测，用于将来的进一步实验。在本次实验中，我们观察了1UM的SCH442416对低氧状态下Müller细胞的GS,GLAST的表达的影响，及将SCH442416制备成纳米滴眼液的药学检测，为将来研发新的眼部药物提供新的思路。