自噬抑制联合多西他赛纳米给药系统抗晚期前列腺癌研究

Androgen resistance is a difficult problem in the treatment of terminal prostate cancer.The treatment of this disease was mainly by endocrine therapy,combination treatment based on docetaxel(DTX) is the major scheme after complete failure of endocrine therapy,but drug resistance has been reported in clinical therapy.Beclin1 and other autophagy proteins were expressed higher in terminal prostate cancer，inhibition of autophagy can promote the apoptosis of terminal prostate cancer cells，improve the sensitivity of tumor cells to DTX,enhance the efficacy of DTX.Based on the preliminary study(Mark funds 81372762),this project with targeted micelles delivery system as co-carrier of DTX and Beclin1siRNA，antibody anti- SEPT9 i1 targeted towards the prostate cells as target head group,and elucidate its mechanisms of synergistic effect against terminal prostate cancer，intracellular transport mechanisms，in vivo distribution characteristic，curative effect and safety.This research project would open a new way for target therapy against terminal prostate cancer with androgen resistance.

激素抵抗是晚期前列腺癌治疗的难题。该疾病的治疗主要以内分泌治疗为主，以多西他赛（DTX）为基础的联合治疗是内分泌治疗失败的主要治疗方案，但临床报道，已有耐药性的产生。Beclin1等自噬蛋白在前列腺癌细胞中高度表达，抑制自噬可以促进前列腺癌细胞的凋亡，提高肿瘤细胞对DTX的敏感性，增强DTX的疗效。本课题在前期研究基础上（基金标号81372762），采用可与晚期前列腺癌细胞特异性结合的抗体anti- SEPT9 i1为靶头，首次构建共载DTX和Beclin1siRNA的靶向纳米胶束递释系统，从自噬抑制、化疗增敏及靶向给药等多层次研究其抗晚期前列腺癌的协同作用机理、胞内转运机制、体内分布特征、疗效及安全性。为激素抵抗晚期前列腺癌治疗提供新的思路和方法。

目前，肿瘤治疗存在很多难点，一些患者在接受治疗时发生耐药及术后放化疗后肿瘤复发、转移。有研究表明，自噬在乳腺癌的发生发展以及治疗过程中发挥着重要的作用。自噬是一种广泛存在于真核生物的细胞中高度保守的一种依赖溶酶体的降解途径，是通过清除自身衰老、受损的细胞器，或通过降解蛋白质、脂类等生物大分子供细胞再次利用，以维持细胞内环境稳态，被认为是与化疗失败的重要耐药机制之一。本课题利用硫辛酸修饰的多肽形成的胶束共递送广谱抗癌药多西他赛（DTX）和自噬抑制基因药物 ATG7siRNA（siATG7），从体内和体外对其抗乳腺癌的作用机制进行研究。.第一部分对共载药物多肽胶束的构建及表征进行了报道。通过固相合成法合成了硫辛酸修饰的多肽单体，其五元环内的二硫键在半胱氨酸催化下实现分子间交联，形成多肽单体聚合的载体。然后采用超声乳化的方法制备胶束及载药，表征结果表明超声乳化法所制备的多肽胶束的平均粒径为165nm左右，电位值在31mV左右，载药量在8.81%左右。.本课题的第二部分进一步报道了共载药物的多肽胶束抗乳腺癌的体外评价。选择MCF-7细胞系进行研究，体外细胞实验表明，硫辛酸多肽胶束可以有效介导siATG7在MCF-7细胞内发挥作用并抑制了化疗药多西他赛引起的自噬，通过自噬抑制而实现增强化疗药的疗效的作用，多西他赛和siATG7可协同抗乳腺癌细胞增殖及周期阻滞并促进乳腺癌细胞凋亡。.本课题的第三部分对共载药物的多肽胶束体内抗乳腺癌作用进行了报道。成功构建了MCF-7乳癌裸鼠移植瘤模型，活体成像结果显示胶束具有较好的体内靶向性。肿瘤生长抑制实验和肿瘤组织的HE染色切片观察显示，多西他赛和siATG7在硫辛酸多肽胶束介导下，可以起到协同抑制裸鼠乳腺癌移植瘤生长的作用。最后进一步通过HE对其安全性进行了考察，结果表明该多肽胶束具有较低的系统性毒性。.通过对本课题进行研究，以多肽胶束作为载体，共载化疗药物和基因药物。通过抑制化疗药引起的自噬实现增敏为临床治疗乳腺癌以及其他癌症的综合治疗提供了参考依据和借鉴。