槲皮素联合多西他赛增加CRPC化疗敏感性和抑制远处转移的作用和机制研究

Androgen Deprivation Therapy (ADT) has been the first line therapy in advanced prostate cancer for decades. However, despite an initial response to ADT in nearly all patients, this eventually fails and leads to Castration Resistant Prostate Cancer (CRPC). Docetaxel (Doc) is the firstline treatment of CRPC and has many limitations such as chemotresistance. Quercetin is a natural flavonoid compound, which can greatly inhibit the growth of a variety of tumors. In our previous study, we have found that quercetin inhibite human prostate cancer cells and xenograft tumors growth that may be related with androgen receptor, PI3K/AKT and TSP-1/ CD36 signal pathways. Moreover, androgen receptor and PI3K/AKT signal pathways also contribute to Doc chemoresistance in CRPC and angiogenesis is an important mechanism of distant metastasis of prostate cancer. Therefore, these findings make us speculate that querccetin combined with docetaxel can greatly enhance Doc treatment both in vitro and in vivo that are realized by inhibiting androgen receptor and PI3K/AKT signal pathways and inhibiting distant metastasis through TSP-1/ CD36 signal pathway. The current study is conducted at the whole, cellur and molecular levels combined with a variety of molecular biological techniques to reveal the concrete signal pathway change in quercetin combining with docetaxel enhancing . This project will provide new theoretical method for preventing and treating prostate cancer.

晚期前列腺癌以雄激素剥夺治疗为主，但治疗后大部分患者进展为去势抵抗性前列腺癌（CRPC）。多西他赛是CRPC一线化疗药，但耐药发生率高。槲皮素是天然黄酮类化合物，可抑制多种肿瘤生长。我们前期研究发现，槲皮素可通过抑制雄激素受体和PI3K/AKT信号通路发挥抗前列腺癌作用，通过上调TSP-1/ CD36通路抑制前列腺癌血管生成及移植瘤生长；且有研究表明雄激素受体和PI3K/AKT信号通路的激活是多西他赛化疗耐药的原因，而且血管生成是前列腺癌远处转移的重要机制。因此，我们推测槲皮素联合多西他赛可以通过抑制雄激素受体和PI3K/AKT信号通路增强化疗敏感性，通过上调TSP-1/ CD36通路抑制肿瘤血管生成进而抑制前列腺癌远处转移。本项目采用多种分子生物学实验方法，明确槲皮素联合多西他赛增强化疗敏感性及抑制远处转移在两药协同抗前列腺癌中的作用及具体信号通路变化情况，为晚期前列腺癌治疗提供新方法。

晚期前列腺癌以雄激素剥夺治疗为主，但治疗后大部分患者进展为去势抵抗性前列腺癌（Castration resistant prostate cancer，CRPC）。多西他赛是转移性前列腺癌公认的一线化疗药物。然而，随着多西他赛药物的应用，肿瘤会逐渐增加对化疗药物的耐受性，这极大地限制了化疗药物效果及患者生存获益。槲皮素是一种天然黄酮类化合物，在自然界分布广泛，近年来槲皮素在抗肿瘤方面的作用备受关注。有研究表明雄激素受体和PI3K /AKT信号通路的激活是多西他赛化疗耐药的原因，而我们前期研究发现，槲皮素可通过抑制雄激素受体和PI3K/AKT信号通路发挥抗前列腺癌作用。因此，我们本研究的主要目的和内容是明确槲皮素与多西他赛联用是否增加前列腺癌对多西他赛的敏感性以及逆转前列腺癌对多西他赛的耐药性，并进行其相关机制探讨。. 因此，本研究首先诱导了前列腺癌的耐药细胞株，探索了槲皮素和多西他赛最佳的搭配浓度，然后采用多层次（体内，体外实验），多种实验方法（增殖实验、克隆形成实验、迁移实验、侵袭能力实验、流式细胞实验、免疫组化、蛋白质印迹，PCR等），证明了槲皮素与多西他赛联用，可以增加前列腺癌对于多西他赛化疗敏感性，逆转多西他赛耐药，主要表现为联合用药能够更显著的抑制耐药肿瘤增殖、迁移、侵袭，并且能够更显著地诱导前列腺癌细胞凋亡。其作用机制主要是槲皮素与多西他赛联用能够最大程度地激活凋亡信号途径，下调MALAT1的表达，逆转前列腺癌细胞的EMT(上皮-间质转化)，抑制PI3K-Akt信号通路激活，从而抑制前列腺癌细胞的侵袭、迁移并促进癌细胞凋亡。本研究的意义在于为其应用于治疗前列腺癌提供理论依据和实验基础，为前列腺癌防治提供一个新靶点和新方法。