蟑螂过敏原组分解析诊断方法的建立和应用

蟑螂是仅次于尘螨的第二大过敏源。目前临床上蟑螂过敏主要通过皮试和测定血样中特异性IgE两种方法来诊断。目前这两种方法都使用蟑螂虫体抽提物标准样品，很易导致假阳性和假阴性。鉴定出抽提物中过敏原蛋白成分并用于过敏原的诊断称为组分解析诊断方法。它能够精确地诊断出病人对那些过敏原蛋白过敏，过敏程度如何。从而为下一步个性化治疗提供依据。目前组分解析诊断方法采用ELISA，蛋白芯片和免疫印迹三种方法。近年来发展的流式细胞仪微球检测技术（CBA）能够同时对单个样品中的多个指标进行检测，分析灵敏度高达pg/ml级别,检测范围达0-5000pg/ml。本项目就是采用分离纯化技术得到天然美洲大蠊过敏原蛋白，利用CBA技术，建立流式细胞仪体外组分解析诊断蟑螂特异性过敏原的技术，并应用于蟑螂过敏临床诊断。

蟑螂是仅次于尘螨的第二大过敏源。目前临床上蟑螂过敏主要通过皮试和测定血样中特异性IgE 两种方法来诊断。目前这两种方法都使用蟑螂虫体抽提物标准样品，很易导致假阳性和假阴性。鉴定出抽提物中过敏原蛋白成分并用于过敏原的诊断称为组分解析诊断方法。它能够精确地诊断出病人对那些过敏原蛋白过敏，过敏程度如何。从而为下一步个性化治疗提供依据。目前组分解析诊断方法采用ELISA，蛋白芯片和免疫印迹三种方法。近年来发展的流式细胞仪微球检测技术（CBA）能够同时对单个样品中的多个指标进行检测，分析灵敏度高达pg/ml 级别,检测范围达0-5000pg/ml。本项目就是采用基因克隆蛋白表达技术得到美洲大蠊过敏原蛋白，建立体外组分解析诊断蟑螂特异性过敏原的技术，同时利用CBA技术，采用单一血清测定多个过敏原蛋白。本项目还采用基因重组技术得到多个德国小蠊过敏原蛋白，对美洲大蠊未知过敏原蛋白进行了探索，采用过敏蛋白组学方法鉴定出美洲大蠊多个新的过敏原蛋白，建立了美洲大蠊cDNA文库，建立了质谱鉴定数据库检索的生物信息学方法。同时利用建立的过敏原活性鉴定平台，对牛虻和胡蜂过敏原蛋白进行了研究。