基于药动学与药效学相关联的养阴通脑颗粒多组分配伍方对脑缺血再灌注损伤保护作用机制研究

The prescription compatibility theory of TCM is one of the key scientific problems of Chinese Medicine. The compatibility is the essence of multiple components combination, and the components interaction is mainly reflected in the PK, PD and other links. By now the PK study of Chinese medicine usually using the method of western medicine's, which has defects like not analyzing the components interaction. On the basis of preliminary, guiding by the theory of prescription compatibility, basing on the associated theory between PK and PD, artificial neural networks and other methods have been introduced.Taking components compatibility of yangyintongnao granule as a demonstration. Making the model of cerebral ischemic reperfusion injury. Using HPLC、GC/MS、LC/MS、FTIR、NMR、LC/ESI-MS and other modern chemistry analysis methods to determining or characterizing the pharmacokinetics change of each components in animal's blood、brain 、liver and kidney, dynamically detecting the action on cerebral blood flowing、 oxygen free radical、amino acids and catecholamines neurotransmitters at the same time, and the action on micro vascular inflammatory cascade reaction (TNF-α、IL-1β、ICAM-1、metalloproteinase-9 ) of early cerebral ischemia and so on. Gradually establish the study methods of reflecting the characterize of PK、PD of Chinese medicine multiple components and other related methods, in order to achieve the goal of explaining the prescription compatibility theory、prescription optimization、discussing the mechanism of prescription function deeply from the point of innovation, and it plays an important scientific role in the study of Chinese medicine PK and prescription compatibility.

中医方剂配伍原理是中医药学关键科学问题之一,配伍实质是多组分的组分合和，组分相互作用主要反映在药动学（PK）、药效学（PD）等环节。目前中药PK研究多套用西药PK方法,存在不能分析组分相互作用等缺陷。 在前期基础上,以方剂配伍理论指导,基于PK与PD相关联理论,引入类神经网络等法。以养阴通脑颗粒中组分配伍为示范,制作脑缺血再灌注损伤模型。重点以HPLC、GC/MS、LC/MS，FTIR、NMR、LC/ESI-MS等现代分析法测定或表征各组分在动物血液、脑及肝肾药代变化。同步动态检测对脑血流、氧自由基、氨基酸及儿茶酚胺类神经递质等作用,对脑缺血早期微血管炎症级联反应（TNF-α、IL-1β、ICAM-1、MMP-9等）作用。 逐步建立反映方剂多组分PK、PD特征及其相关联研究方法,实现从新创新角度阐明方剂配伍原理、优化方剂、深入探讨方剂作用机制的目标,对中药PK、方剂配伍研究有重要科学意义。

目前中医方剂或中药PK研究多按西药PK方法进行单个成分分析，难以反映中医方剂或中药复方多组分及其相互作用等特征。现较少有复方多成分PK参数整体化、综合分析的研究方法。本项目在以往已建立养阴通脑颗粒中活性物质分离分析方法基础上，开展基于药动学与药效学相关联的养阴通脑颗粒多组分配伍方对脑缺血再灌注损伤保护作用机制研究。现已按研究计划，经四年研究完成了研究任务，取得了较好的成果。. 主要内容和重要结果：采用HSCCC等分离纯化有效部位，制备了养阴通脑颗粒主要有效部位（黄酮、生物碱、皂甙、挥发油等）；采用R语言多目标等算法进一步优化了养阴通脑颗粒组方中主要有效部位配伍和有效成分提取工艺；采用HPLC、HPLC/MS等建立了养阴通脑颗粒活性成分及其在血样品中的分析方法；考察了养阴通脑颗粒主要有效成分配伍的肠吸收特性研究；制备了养阴通脑颗粒中主要有效成分葛根素-PEG改性壳聚糖微球及其表征的研究；研究了养阴通脑颗粒及其主要有效部位配伍和有效成分配伍后对脑缺血再灌注大鼠保护作用和作用机制研究；养阴通脑颗粒主要有效部位配伍和有效成分配伍给药后，不同时相同步开展了PK、PD 研究，引入时间序列、多元分析等方法，进行了多成分主辅配伍和整体特征分析及PK-PD模型构建等。结果表明，养阴通脑颗粒及其有效部位、有效成分对脑缺血性损伤具有较好的保护作用，不同配伍组方对各项指标有较好的协同效应。本项目研究探讨了复方药效物质基础、配伍原理及作用机制，反映了复方多成分PK整体、综合变化特征，提供复方多成分体系研究新方法，有助于寻求适合不同病期或病证的最佳有效部位组方，开拓该病治疗思路，提高疗效。. 正式发表论文26篇，其中SCI收录3篇，会议交流论文1篇（均带标注）；获浙江省科学技术进步奖二等奖2项，浙江省中医药科学技术奖一等奖1项；获国家专利授权4项；出版专著3部；项目负责人入选为浙江省卫生领军人才培养对象，被评为十佳浙江省优秀科技工作者，培养研究生16名。