靶向性阻断NF-κB经典通路治疗MS/EAE的策略性研究

NF-κB(nuclear factor κB)经典信号通路的病理性激活在多发性硬化（MS）/实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)中具有重要意义；而IKKβ/NEMO复合物的形成是激活该病理性通路的关键点。本研究拟构建一段与NEMO中IKKβ结合序列同源的活性短肽NA42，竞争性抑制IKKβ/NEMO之间的结合，特异性阻断NF-κB 经典信号通路和相关炎性反应。与此同时，又能保留NF-κB的部分生理功能（主要由NF-κB非经典通路介导）。通过体外基因融合技术，构建分泌表达阻断肽NA42的腺相关病毒，实现NA42在体内的长期、持续、稳定的"融合分泌表达"策略，并在体内、外试验中验证此肽的表达及对IKKβ/NEMO结合、NF-κB经典信号通路激活的抑制作用，明确其缓解EAE/MS的生物效应。本课题是对短肽类物质在中枢性炎性疾病如MS中应用的探讨性研究，意在为更多的活性短肽类应用提供新的理论和思路

NF-kB(neuclear factor kB)经典信号通路的病理性激活在多发性硬化（MS）/实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中具有重要意义，而IKKb/NEMO复合物的形成是激活该病理性通路的关键点。本研究构建了体外分泌表达重组病毒（rAAV.na42），成功表达一段在NEMO中IKKb结合序列同源的活性生物短肽NA42。结果证实1.生物活性肽段NA42在体外可以竞争性抑制IKK/NEMO之间的结合。2.本研究构建的rAAV.na42可以达到在EAE小鼠体内长期有效表达活性短肽NA42，与此同时，该短肽在保留NF-kB生理性活性（主要由NF-kB的非经典途径介导）情况下，可以特异性阻断NF-kB经典信号通路。3.实现了抑制EAE小鼠的炎症反应。本研究结果提出了短肽类物质在中枢性炎性疾病如MS中的应用策略，为更多的活性短肽类应用提供新的理论和思路。