肺泡表面活性蛋白A调控滤泡辅助T细胞对IgE、IgA生成的影响及在哮喘发病中的作用

Surfactant protein A (SP-A) has been proven to modulate T cell functions, inhibit IgE production and Th2-associated inflammatory indices associated with allergen-induced inflammation. In our previous studies, IgE level and T follicular helper (Tfh) cell proportion in hilar lymph node was proved to elevate in SP-A-/- mice (KO) compared with wild type mice (WT). At present, we are going to establish the role of Tfh cells to help B cells make IgA and IgE at first, and then compare the proportion, phenotype and function of Tfh cells in bronchial membrane and hilar lymph node before and after asthma challenge in KO and WT mice to know if SP-A modulates Tfh cells. We will also compare the IgA and IgE levels in Cd3e-/- mice receiving Tfh cells from KO and WT mice, respectively, in order to determine the modulation function of SP-A to immunoglobins (Igs) is through Tfh cells. We will also learn if the modulation of SP-A to Tfh differentiaion and B cell helper functions is direct, through dendritic cells, or through Th2 cells. At last, we will study the molecular mechanisms of SP-A modulation of Tfh cells to help Igs production. Our study will clarify the modulation axis of SP-A-Tfh-Igs, the role of SP-A in inhibiting IgE production and allergen-induced inflammation. The results will help us to find new targets for asthma therapy.

既往证实SP-A具有T细胞调节功能，且可抑制IgE，介导哮喘免疫保护。在前期发现SP-A-/-（KO）哮喘小鼠IgE和肺门淋巴结滤泡辅助T细胞（Tfh）比例均较野生（WT）小鼠升高的基础上，依据Tfh辅助B细胞的关键作用，我们在确立Tfh调控IgA、IgE的分泌之后，拟对比研究KO和WT小鼠哮喘激发前后支气管粘膜及肺门淋巴结Tfh比例、表型及功能，确定SP-A能否对Tfh进行调控。并比较接受KO和WT小鼠Tfh移植的Cd3e-/-小鼠哮喘模型IgA和IgE的水平，确定SP-A调控抗体由Tfh介导。随后通过研究SP-A直接，或通过树突状细胞、Th2间接对Tfh分化及B细胞辅助功能的调节，阐明SP-A对Tfh的调节方式。最后研究SP-A调控Tfh介导抗体分泌的机制。本研究结果将阐明SP-A-Tfh-抗体产生的调控轴，明确SP-A抑制IgE，介导哮喘免疫保护的机制，有助于探寻哮喘新的治疗靶点。

哮喘在多数国家都是重大的公共卫生问题。尽管随着医学的进步，哮喘的防控已取得了很大进展，但哮喘的发生在我国仍呈上升趋势，有相当一部分患者对激素抵抗，深深的困扰着临床工作者。哮喘的发生其实与IgE、IgA类抗体的产生密切相关，既往研究已经表明，环境抗原如果诱导机体产生IgA类抗体则可保护机体免于发生哮喘而IgE类抗体则诱导加剧哮喘的气道炎症。因此，如何控制B细胞产生不同类型的针对致敏原的抗体在哮喘的防治中处于核心地位。在本项研究中，我们首先明确了滤泡辅助T细胞（Tfh）是辅助B细胞分泌IgA、IgG等抗体类型的主要Th亚群，且CCR6+CXCR3-的Tfh高分泌IL-17，是介导IgA产生的重要Tfh亚群，而CCR6-CXCR3-的Tfh2高分泌IL-4，具有明显的促IgE类抗体生成的作用。这一结果提示了Tfh亚群的组成在致敏原诱导不同类型抗体产生过程中起核心作用。随后，我们基于Sp-a-/-小鼠建立的哮喘模型证实了肺泡表面活性物质蛋白A(SP-A)对哮喘的保护作用，而且该作用是通过调节Tfh亚群的改变实现的。Sp-a-/-小鼠表现出更严重的哮喘病理特征，并伴明显的IgE类抗体升高，而IgA类抗体下降。与此同时，引流淋巴结内Tfh2升高，而Tfh17亚群降低。在这一发现的基础上，我们更进一步通过体内外实验证明了SP-A是通过调节抗原递呈细胞DC实现对Tfh的调节的。可促DC分泌TGF-β，而抑制IL-4和IL-13等细胞因子的表达，以SP-A调节的DC处理哮喘小鼠，能抑制哮喘的病理改变，改变引流淋巴结内Tfh的组成，同时改善外周血及BAL中IgA/IgE的比例。因此，本研究不仅证明了SP-A的免疫调节作用，对哮喘的保护作用，而且阐释了其机制为通过树突状细胞调节Tfh亚群的组成。该课题为哮喘的防治提供了新的观点与思路。