三氧化二砷在心脏移植慢性排斥反应中作用的实验研究

为临床寻找一种价格低廉、副作用较小的抗排斥反应新药，本研究将在国际上第一次使用中药三氧化二砷作为核心抗排斥反应药物，对实施同种异体异位（腹腔）心脏移植的大鼠实施腹腔注射治疗，观察不同剂量下的三氧化二砷诱导移植免疫耐受的疗效；研究了不同剂量的三氧化二砷对接受心脏移植的大鼠外周血CD4+、CD8+和血清IL-2、IL-4、IL-10、IL-6、IL-1β，IL-13、TGF-β1、IFN-γ以及对外周血T细胞功能的影响。前期试验已经证明三氧化二砷对心脏急性排斥反应有抑制作用，本实验将进行深入研究其抗慢性排斥反应诱导移植免疫耐受的作用及机理。这既符合我国中医中药现代化的总体发展思路，又符合我国国情；从中药中开发新型免疫调节剂，可以充分发挥我国中药资源丰富的优势，达到缩短我国在此领域与国际间差距的目的。

三氧化二砷（Arsenic trioxide，ATO）是一些中药制剂的共同组成部分，用于治疗急性早幼粒细胞白血病和一些类型的癌症。在这项研究中我们调查了大鼠心脏移植模型中ATO对移植物存活期的作用。Lewis大鼠为受体，DA鼠为供体，进行心脏移植，移植后分别给予三氧化二砷腹腔注射，剂量分别为5、3.75、2.5、1.25、0.625 mg/kg/日连续14天，测量每组中位生存期。我们也进行了Adoptive transfer、心脏移植物的组织学检查、免疫组化检查、细胞增殖测定、检测受体血中细胞因子的量和流式细胞技术评估调节T细胞的诱导情况。ATO治疗组显著延长了移植心脏的存活时间，而未接受治疗者早起产生了强烈的排斥反应，但5和3.75 mg/kg组受体死亡率较高。ATO治疗组CD3+ CD4+细胞及CD3+ CD8+细胞在外周血中比值减少，并能明显抑制移植物内的细胞浸润、减轻心肌损伤；ATO治疗组受体体内及移植物内CD4+ CD25+ Foxp3+细胞含量增加，结合混合淋巴细胞培养及Adoptive transfer实验，证实ATO治疗组受体体内产生了抑制性的调节T细胞。另外，ATO治疗组受体血浆中IFN-γ及IL-17的含量降低，而IL-10、IL-35及TGF-β的含量却增加。总之，在完全同种异体心脏移植过程中，ATO 治疗诱导了受体的低反应性，抑制了CD3+CD4+细胞及CD3+CD8+细胞，并诱导了CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞的产生。..