HGF/c-met信号通路调控失神经喉内肌纤维化的机制研究

长期失神经喉肌萎缩纤维化造成喉肌再生能力下降，是导致神经修复效果不佳的主要原因。文献及申请人前期研究发现肝细胞生长因子（HGF）可延缓动物横纹肌萎缩纤维化的进程，但机制尚不清楚。本课题通过重组HGF蛋白、基因过表达和鼠源性HGF-shRNA干扰上调或下调HGF体内表达水平，检测促纤维化因子转化生长因子β1（TGFβ1）及其下游纤维化相关蛋白和凋亡相关信号因子表达改变，定量分析HGF/c-met通路抑制失神经喉肌纤维化的作用及可能分子机制。再通过基因修饰或注射重组HGF蛋白，从肌细胞水平离体定量研究TGFβ1及纤维化相关蛋白和凋亡相关信号因子表达改变；并采用组成型激活/失活技术，明确参与HGF/c-met调控TGFβ1诱导肌细胞纤维化作用的信号转导通路。旨在通过HGF/c-met信号通路调控抑制TGFβ1诱导的肌细胞纤维化，保护失神经喉肌再生能力，为提高神经修复效果提供新的治疗策略和理论

肝细胞生长因子（HGF）可延缓动物横纹肌萎缩纤维化的进程，但机制尚不清楚。本课题通过HGF基因过表达上调HGF体内及体外的表达水平，检测促纤维化因子-转化生长因子β1（TGFβ1）及其下游纤维化相关蛋白的表达改变，定量分析HGF抑制失神经骨骼肌纤维化的作用及可能分子机制。再通过基因修饰HGF，从肌细胞水平离体定量研究TGFβ1及纤维化相关蛋白表达改变；采用组成型激活/失活技术，明确参与HGF调控TGFβ1诱导成肌细胞纤维化作用的信号转导通路。结果表明：1、TGF-β1可促进成肌细胞collagen-I、CTGF、α-SMA 在转录和蛋白水平的表达，在促成肌细胞表型转化进程中发挥重要作用。2、HGF可以抑制失神经骨骼肌纤维化并调控TGFβ1诱导成肌细胞表达collagen-I、CTGF和α-SMA，抑制其表型转化，为治疗失神经喉肌细胞纤维化在细胞和分子水平提供了依据。3、HGF抑制TGFβ1诱导成肌细胞纤维化过程中ERK1/2、JNK通路有激活现象，阻断该通路后HGF对TGFβ1诱导成肌细胞纤维化的抑制作用有明显减弱；smad通路有抑制现象，提示HGF可能通过ERK1/2、JNK通路抑制TGFβ1-smad通路的激活，从而抑制TGFβ1诱导成肌细胞纤维化的作用。上述研究结果提示：HGF对TGFβ1诱导失神经骨骼肌纤维化及成肌细胞纤维化有明确的抑制作用，该作用可能通过ERK1/2、JNK通路的激活及smad通路的抑制实现。. 本项目完成6篇论文（中文1篇、英文5篇）的撰写工作（均已发表），获得省部级医学科技二等奖一项，国家实用新型发明专利1项，培养硕士及博士研究生共4名（已毕业2名）。