肾固有树突状细胞在肾脏缺血再灌注损伤中的作用及其机制

肾缺血再灌注(IR)损伤显著增加肾移植及普通患者死亡率，目前尚无有效临床治疗。肾固有树突状细胞（rDC）是主要的肾间质白细胞，在肾脏天然免疫反应中发挥关键作用，但其在肾脏IR损伤中的作用及机制仍不明确。rDC既可通过分泌TNF等促炎因子介导损伤，也可通过自身或诱导其他细胞分泌IL10等抗炎因子提供保护。前期研究采用的清除rDC的方法缺乏特异性，且未直接评估过rDC在肾脏IR中的作用。为此，我们选用了可特异性清除rDC的CD11c+GDTR转基因小鼠，预实验发现清除rDC可改善IR后肾功能。在此基础上本项目拟采用流式细胞分析和细胞分选技术，结合免疫荧光共聚焦定位分析，联用小鼠同系肾移植冷缺血损伤模型和双肾IR热缺血损伤模型，研究肾脏IR后rDC免疫学特性变化，通过清除rDC并选择性过继回输相应亚型或IL10缺陷rDC，探究其在肾脏IR损伤及修复中的作用及机制，为临床治疗IR损伤提供新的方向。

本课题以肾固有树突状细胞（rDC）为研究对象，利用可特异性清除rDC的CD11c+GDTR转基因小鼠及双肾缺血再灌注（IR）损伤模型，探索了rDC在肾脏IR损伤中的作用及机制。通过使用白喉毒素（DT）清除CD11c+GDTR转基因小鼠的rDC，发现DT清除的rDC在肾脏IR中发挥了保护作用，并明确DT主要清除了CD11c+F4/80-亚群rDC，其表面的CD40，CD80，CD86表达在IR后均显著升高。通过向已清除rDC的CD11c+GDTR小鼠过继回输C57BL/6J小鼠及IL-10-/-小鼠脾脏DC，我们明确了重建肾脏rDC所需的时间动力学指数和最佳回输剂量，并证实了IL-10在rDC调控肾脏IR损伤中具有保护作用。本课题的研究为今后减轻及治疗IR损伤提供了新的思路。