lncRNA-H19/Osteoglycin促进间充质干细胞成骨分化的分子机制及在后纵韧带骨化中的作用研究

Cervical ossification of posterior longitudinal ligament (OPLL), as a common disease, could cause spinal cord injury and paraplegia, which would cause serious society load. The nature of OPLL is the osteogenic differentiation and the regulatory mechanisms remain unknown. The research of osteogenesis is key point of analyzing the etiology of OPLL. Previous research has proved the lncRNA-H19/OGN plays the enhancement effect during the osteogenic differentiation. In order to reveal the mechanism of H19/OGN, the overexpression and silence functional research will be performed to evaluate the effect on the differentiation and OPLL in cell, protein and gene aspects. The relationship between the expression level of H19/OGN in serum/ligament and clinical characteristic of OPLL will be evaluated to reveal the practical value. The research aims to investigate the regulatory mechanism of H19/OGN in osteogenetic differentiation and OPLL, which would help enrich the research scope of lncRNA-H19 and OGN, analyze the etiology of OPLL, and provide the new direction and thought for the early diagnosis and intervention of OPLL.

颈椎后纵韧带骨化（OPLL）是以正常韧带骨化为特点的常见颈椎疾病，可导致脊髓损伤及瘫痪，造成严重的社会负担。OPLL的实质是细胞成骨分化过程，具体发病机制仍不明确，成骨分化机制是其病因研究的突破点。前期研究表明lncRNA-H19/Osteoglycin（OGN）在细胞成骨分化中上调表达，发挥促成骨作用。为进一步明确H19/OGN的作用机制，本研究通过过表达/干扰功能研究，在细胞、基因及蛋白水平深入分析其促成骨作用，分析其在OPLL病因中的作用机理，通过血清及后纵韧带组织中H19/OGN的表达水平与OPLL的临床表型进行关联分析，进行临床验证，评价其临床应用价值。本研究旨在深入分析H19/OGN促成骨分化的调控分子机制及在OPLL中的作用，有利于丰富H19及OGN的功能研究，深入探讨OPLL的发病机制，为OPLL的早期诊断及干预提供新的方向和思路。

颈椎后纵韧带骨化(OPLL)是临床常见颈椎疾病，以韧带骨化为特点，可导致脊髓损伤及 瘫痪，造成严重的社会负担。OPLL的实质是细胞异常成骨分化过程，具体发病机制仍不明确，成骨分化机制是其病因研究的突破点。该研究以间充质干细胞（MSC）成骨分化的调控机制及OPLL的发病机制研究为出发点，旨在分析探讨lncRNA H19/OGN作用通路促进成骨分化的调控分子机制及其在OPLL发病机制中的作用。研究首先构建了lncRNA H19及OGN 过表达及沉默表达慢病毒载体，通过转染MSC建立稳点转染细胞系，对比不同组别MSC成骨分化能力，进而在细胞、分子及蛋白水平通过功能研究分析H19-OGN作用通路的调控作用。我们收集了OPLL及非OPLL对照人群血清及后纵韧带组织标本，定量检测了H19/OGN及成骨分化标志物的表达水平。对OPLL患者后纵韧带组织标本进行了空间蛋白质组学研究，对同一组织标本三个不同位点筛选了差异表达蛋白，通过生物信息学分析进一步探讨分析OPLL发病机制中的关键蛋白。该研究通过lncRNA-蛋白通路作用机制研究，丰富了lncRNA H19与OGN的功能研究，深入探讨了MSC成骨分化机制及OPLL的发病机制，为OPLL的发生发展病理机制研究提供了新的思路和方向。