基于慢性乙肝感染者队列建立肝癌早期诊断标志物的研究

Currently, HCC related HBV mutations have been discovered based on prospective cohort study; however, the evolution of these related HBV mutations in long-term outcome of hepatitis B is still uncleared, as well as their effect on tumor formation. Meanwhile, the microRNAs, recently discovered tumor biomarkers, play important roles in the early detection of tumors. Exploring the evolution of these biomarkers in long-term outcome of hepatitis B contributes to definite their clinical utility. On the basis of the prospective cohort in chronic HBV infection we conducted in 2007, this project is proposed to identify a mutation and miRNA profile for discrimination between HBV carriers who will and will not develop HCC and establish a HCC risk score. The study results in this project will be used to predict HCC risk in chronic hepatitis B patients, screen high-risk populations, and provide a new tool for early prevention, diagnosis and treatment for HCC.

近几年，基于前瞻性队列已发现多个与原发性肝癌相关的慢性乙型肝炎病毒（HBV）突变，但这些突变在肝癌发生前的演变及如何参与肝癌的发生过程尚未明确；微小RNAs（miRNAs）是一类重要的肿瘤生物标志物，在肿瘤的早期诊断中具有较好的临床价值。因此，在长期肝炎病程中结合环境、宿主因素，探索生物标志物的演变，有助于阐明其与肝癌的发生关系，并明确其在临床中的转化应用价值。本课题组拟在慢性HBV感染者前瞻性队列的基础上，从宿主、环境两方面出发，针对新发肝癌患者及慢性HBV感染者，采用高通量测序技术动态监测病毒突变，同时结合血浆miRNA表达的变化，建立早期肝癌病人的病毒突变谱及血浆标志物表达谱，并建立肝癌风险评分，评估其在肝癌风险预测中的价值。本研究成果有望用于肝癌风险预测及高危人群筛查，在降低肝癌发病率及个体化治疗方面具有重大意义和价值。

研究背景：HBV突变的累积是影响HCC发生的重要因素，既往大量研究发现了一批肝癌相关的HBV突变。为HCC的发生机制及个体化预防提供了新的思路。既往的研究存在一些共性和不足：既往研究大多局限于EnhII/BCP区；较少基于HBV全基因组的关联研究。大多为基于一代测序的检测方法；仅能检测到克隆大于20%的突变；忽略了低频突变。既往研究大多为基于某一特定时点的病例对照研究；然而不同免疫状态，HBV处于动态进化。故单一时点比较并不能发现全部的HCC相关突变。研究目标：在慢性HBV感染（肝癌高危人群）中，采用二代测序方法对HBV全基因组进行测序，发现更为可靠的的肝癌早期标志物；并探索这些关键HBV突变在肿瘤发生过程中的变化规律及进化模式。研究结果：完成了中国汉族人群430例HBV-HCC患者和275例HBV持续感染者的生物样本收集，建立了生物标本库和流行病学数据库。完成了HCC发病相关的 HBV 基因组突变谱的鉴定。鉴定了肝癌相关HBV突变，并解释HBV在肝癌发生发展进程中突变的变化趋势。