新疆特色植物药桑降血糖活性成分及协同效应研究

Yao sang (Morus nigra L.) in Xin Jiang, which is a unique in country, belong to a very rare medicinal mulberry resources (Morus nigra L.) . Modern pharmacological studies have shown its leaves are rich in flavonoids, alkaloids, polysaccharides, and other biologically active substances, which have play a role of prevention and treatment of diabetes. However, it is still unclear about its active ingredient and synergistic effect. The mulberry leaf from yaosang (Morus nigra L .) was selected as materials in this project, its main hypoglycemic active ingredients include of flavonoids, alkaloids and polysaccharides were extracted, separated and purified. Bases on the total content of the three kinds of active ingredients and the results of activity tracking of a-glucosidase inhibitor in vitro screening model, The integrated extraction processing of hypoglycemic active ingredients from mulberry leaf were established. The monomer compound could be obtained by the mean of the high-speed countercurrent chromatography(HSCCC),preparation performance liquid chromatography (PHPLC) and other chromatographic separation technology. According to the activity experimental evaluation of diabetic mice screening model in vivo and a-glucosidase inhibitor in vitro screening model, the active ingredient with a hypoglycemic function could be obtained, based on Chou-Talalay method, using CompuSyn soft, Exploring the synergistic effect of its hypoglycemic activity. The results of this study could provide experimental support for yaosang in the way of efficient use and the related functions products development.

药桑(Morus nigra L.)是新疆在全国独一无二的、在自然界极为罕见的珍稀药用黑果桑资源。现代药理研究表明，药桑桑叶含有丰富的黄酮、生物碱、多糖等生物活性物质，对糖尿病具有一定的预防和治疗作用。然而，其活性成分及相互协同增效关系尚不清楚。 本研究以药桑桑叶为材料，通过对黄酮、生物碱和多糖的提取及系统分离、精制，以三种活性成分的总含量结合α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选模型活性跟踪，建立药桑桑叶降血糖主要活性成分集成提取工艺；通过高速逆流色谱（HSCCC）、制备液相色谱（PHPLC)等色谱分离技术获得单体化合物，对获得的单体或单体组合物进行糖尿病小鼠体内活性筛选；在体内外活性筛选实验评估，获得具有降血糖功能的活性单体或组合物的基础上，依据中效原理，采用CompuSyn软件，进一步探讨其降血糖活性的协同增效关系。本研究为药桑资源的高效利用和相关功能性生物制品的研制开发提供实验支持。

糖尿病（Diabetes Mellitus）是一种常见的分泌代谢型疾病，以高血糖为主要标志，α-葡萄糖苷酶抑制剂是一类口服降血糖药，文献报道桑类植物在多种植物中α-葡萄糖苷酶抑制效果最为突出，药桑(Morus nigra L.)是古老药用黑果桑资源，对糖尿病具有一定的预防和治疗作用。.本项目以药桑叶为材料，研究其具有降血糖活性的化学物质的提取、分离，并探讨其降血糖活性的协同增效关系。通过对药桑叶中活性物质黄酮、生物碱和多糖的系统提取、精制，以三种活性成分的总含量结合α-葡萄糖苷酶抑制活性跟踪，建立了药桑叶降血糖主要活性成分生物碱、黄酮和多糖的集成提取工艺；采用各种色谱分离技术和波谱鉴定方法，从药桑叶中获得黄酮单体化合物12个，其中8个首次从新疆药桑叶中分离得到，酚酸类化合物10个（新化合物1个）。筛选出抗氧化活性较好的四种黄酮单体-芦丁、金丝桃苷、草质素-7-O-(3″-O-β-D-葡萄糖基)-α-L-鼠李糖苷、德钦红景天苷，进行了抗氧化协同作用研究，发现除德钦红景天苷外，其他三种黄酮单体间具有协同增效作用；鉴定出生物碱类单体3个，分别为1-DNJ、fagomine、N-Me-1-DNJ，其中2个为高活性降糖成分；均多糖2个，均为α-吡喃糖，分子量分别为5.43、12.16Kda；活性筛选实验表明，对ɑ-葡萄糖苷酶的抑制作用：生物碱>阿卡波糖（阳性对照）>黄酮，多糖活性不明显，即桑叶中生物碱具有良好的降血糖活性，进一步采用CompuSyn软件做体外协同分析，结果显示桑叶的三种活性物质之间，在高质量浓度下，0.95<fa≦1时，CI<1，表现为较好的协同增效作用。该研究丰富了桑叶降血糖成分的相关信息，为药桑资源的高效利用和相关功能性生物制品的研制开发提供实验支持。