羊痘病毒表达载体的构建

本研究将通过建立我国羊痘病毒弱毒疫苗株基因组文库，从中克隆、筛选该疫苗株复制的非必需区以及可用于表达外源蛋白的病毒启动子。利用筛选得到的非必需区、启动子以及痘病毒启动子调控下的报告基因为元件构建羊痘病毒表达载体，通过表达载体与羊痘病毒疫苗株在细胞内的同源重组，筛选表达报告基因的重组病毒。以重组病毒中报告基因的表达量和重组病毒的传代稳定性来评价筛选的启动子强弱、非必需区遗传稳定性等表达载体的性能，力求获得能够稳定、高效表达外源基因的表达载体，为进一步构建以羊痘病毒为载体的重组二价或多价活疫苗应用于羊痘和其它疫病的防疫打基础。