病毒嵌合基因反向重复表达载体的构建及其抗性功能分析

本研究的核心内容是基于转录后基因沉默和分子病毒学以及甘蓝抗病毒育种的最新研究进展，针对黄瓜花叶病毒（CMV）2b基因和芜菁花叶病毒（TuMV）CP基因的序列保守区，构建这两种病毒的嵌合基因的反向重复植物表达载体，转化甘蓝并分析病毒嵌合基因的抗病毒功能。拟分别获得来源于国内甘蓝作物上的黄瓜花叶病毒2b基因和芜菁花叶病毒CP基因的序列保守片段，经正向串联后得到两种病毒特定序列嵌合的目的基因，通过插入内含子（Intron）的方式，构建可引发高效基因沉默的反向重复植物表达载体，转化甘蓝并分析RNA水平上嵌合基因的表达和抗病毒功能。本项目的完成，可进一步加深对转录后基因沉默现象的认识，并可获得具有自主知识产权的抗性基因和抗两种病毒的甘蓝材料，加速甘蓝抗病毒育种进程。