古菌引物合成与延伸的偶联机制及调控规律

引物由DNA引发酶合成后向DNA聚合酶的转移过程是DNA复制过程中的一个关键偶联环节。古菌引发酶是由催化亚基和非催化亚基组成的二聚体，与真核生物引发酶中的引发酶二聚体同源；但与后者不同，古菌引发酶不含DNA聚合酶a和B亚基，并且具有独特的体外活性。目前，还不清楚古菌引发酶合成引物后如何将其传递给DNA聚合酶。本实验室最近发现，极端嗜热古菌-硫矿硫化叶菌引发酶与复制蛋白C（RFC）之间存在物理和功能相互作用，并据此提出了关于古菌引物合成与延伸步骤之间偶联机制的工作模型。本项目拟以硫矿硫化叶菌为模式，深入分析古菌DNA引发酶和RFC的作用机制，解析引发酶与RFC相互作用的分子细节，全面揭示引物合成与延伸步骤之间的偶联机制；同时，研究其它复制蛋白以及染色体蛋白对引发酶、RFC活性的影响，探讨复制叉复合物成员对于引物合成与延伸步骤的偶联的调控作用，增加对古菌DNA复制机制的系统认识。