抗长五聚体蛋白3（PTX3）自体抗体在狼疮性肾炎发病机制中的研究

Systemic lupus erythematosus (SLE) is one of the most prevalent autoimmune diseases in China. The pathogenesis of lupus nephritis, a common and serious complication of SLE, has not been fully elucidated. Previous studies suggested that anti-pentraxin 3(PTX3) antibody, a kind of protective autoantibody, had certain correlation with lupus nephritis. Anti-PTX3 antibodies could inhibit the binding of PTX3 with C1q in classical complement pathway and factor H in alternative complement pathway, which suggested that anti-PTX3 antibodies may not only be a biomarker of lupus nephritis, but also could play an important role in the pathogenesis of lupus nephritis. In this study, we intend to isolate anti-PTX3 antibodies from the plasma of patients with lupus nephritis. Through vivo and vitro experiments, we try to prove if anti-PTX3 antibodies could affect the complement activation of PTX3 and the opsonization of macrophages. We hope to reveal that anti-PTX3 antibodies might interfere with the classical complement activation pathway, alleviate renal inflammation and further elucidate the role of anti-PTX3 antibodies in the pathogenesis of lupus nephritis.

系统性红斑狼疮（SLE）是我国最常见的自身免疫性疾病之一，狼疮性肾炎为SLE常见且严重的并发症，其发病机制尚未完全阐明。既往文献和我们课题组的前期工作发现狼疮肾炎患者存在起保护性作用的抗PTX3抗体，且发现抗PTX3抗体可以抑制PTX3与补体经典途径的C1q及补体旁路途经调节蛋白H因子的结合，这些结果提示抗PTX3抗体不仅是狼疮性肾炎的生物学标志物，在狼疮性肾炎的发病机制中也起重要作用。本课题拟从狼疮肾炎患者血浆中分离抗PTX3抗体，通过体外实验从以下几个方面进一步验证该假设：1）干扰 PTX3与C1q及H因子结合从而抑制补体经典及旁路途径的过度活化；2）通过干扰免疫复合物和红细胞的黏附从而减少MAC复合物的形成从而保护细胞免遭补体溶细胞作用；3）阻抑C1q介导的巨噬细胞早期凋亡；4）干扰PTX3对巨噬细胞促炎/抗炎的转化从而缓解肾脏炎症，希望能够阐明抗PTX3抗体在狼疮性肾炎的发病机制。

由严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）引发的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）具有高度的传染性、在全球迅速传播，在严重威胁人类健康和公共卫生安全的同时，造成了巨大的经济损失。已有报道显示，COVID-19患者的主要临床特征之一是血浆C反应蛋白（CRP）水平的升高，且CRP水平与患者的肺损伤程度和疾病严重程度呈正相关。CRP是一种急性炎症中较为常见的临床标志物，它能够识别入侵的病原体和凋亡坏死细胞，刺激补体系统经典途径的激活、从而促进有害物质的快速清除。近期有研究显示，CRP的单体形式mCRP（mono-CRP）能够识别多种配体、调节疾病进程，但CRP是否参与COVID-19的发病机制目前尚不清楚。.研究通过表面等离子共振、竞争结合、表位定位、细胞实验等技术对CRP结合Spike和ACE2的能力进行了鉴定，发现mCRP可以与SARS-CoV-2刺突受体结合域（RBD）结合，并以浓度依赖性竞争刺突RBD与人血管紧张素转换酶2（ACE2）受体的结合。截短突变肽竞争测定和表面等离子体共振结合实验表明，mCRP中的胆固醇结合序列（CBS，氨基酸 35-47）对于介导 mCRP 与尖峰 RBD 的结合至关重要，该序列具有较强的配体识别能力，能够与包括RBD在内的多种分子相结合。在RBD-ACE2 相互作用的细胞模型中，CBS基序有效地降低了RBD 与细胞表面过表达的ACE2的结合。.该研究突出了mCRP在COVID-19先天免疫中的模式识别功能，为将mCRP中的CBS基序发展为具有诊断意义和潜在治疗能力的功能性肽提供了初步的理论依据，有望为针对 CRP 激活构象的炎症干预策略提供新思路。.该研究以“The Cholesterol-Binding Sequence in Monomeric C-reactive Protein Binds to the SARS-CoV-2 Spike Receptor-binding Domain and Blocks Interaction with Angiotensin-converting Enzyme 2”为题发表于国际免疫学会联合会官方期刊frontiers in Immunology杂志上。西安交通大学副教授李海韵、博士生高宁、北京大学前沿交叉学科研究院博士刘赪阳为该论文共同第一作者，北京大学第三医院李秋钰为通讯