基因II型草鱼呼肠孤病毒预测表面纤突与连接粘附分子GcJAM-A的相互作用研究

Grass carp haemorrhage disease caused by grass carp reovirus, GCRV, occurs in nearly all grass carp culture areas resulting in huge threat to aquaculture. The results of previous study showed that, there are three genotypes of GCRV in China and most of epidemic isolates belong to genotype II. It has been proved that the surface fiber protein from orthoreovirus could recognize and combine corresponding junction adhesion molecule which mediates virus virus attachment, infection, and intracellular signaling. The homologous gene, S7, encoded for surface fiber has been found in genome of grass carp reovirus genotype II, and GcJAM-A was also discovered in grass carp recently. In present study, GCRV HZ08, the representative strain of genotype II, was selected for the study, serial tests will conducted to confirm the surface location of protein encoded by S7, explain the relationship between S7 encoded protein and GcJAM-A and discover the impact on virus invasion by the interaction between S7 encoded protein and GcJAM-A. This study will provide basic data for prevent and control GCRV from genotype II.

草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus, GCRV）引起的草鱼出血病是对我国淡水主养品种草鱼危害最大的疾病之一。前期研究结果表明，国内至少有三种基因型的GCRV流行，以II型危害最大，是目前主要的流行株。已有数据显示正呼肠孤病毒的表面纤突蛋白具有诱导宿主产生中和抗体的能力，其与相应连接粘附分子JAM结合，直接介导病毒感染细胞。基因II型GCRV预测存在编码表面纤突蛋白的同源基因（S7节段编码），草鱼中也证实存在连接粘附分子GcJAM-A。因此，本研究欲以基因II型GCRV作为研究对象，通过实验验证S7编码蛋白是否为病毒表面纤突蛋白，确认其诱导宿主产生保护性免疫反应的能力，阐明表面纤突蛋白与GcJAM-A的相互作用，揭示表面纤突在基因II型GCRV侵染细胞过程中的作用，为基因II型GCRV 基因工程疫苗研制和药物治疗的分子靶位提供依据。

草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus, GCRV）引起的草鱼出血病是对我国淡水主养品种草鱼危害最大的疾病之一。前期研究结果表明，国内至少有三种基因型的GCRV流行，以II型危害最大，是目前主要的流行株。因此，本研究欲以基因II型GCRV作为研究对象，通过实验验证S7编码蛋白是否为病毒表面纤突蛋白，阐明表面纤突蛋白与GcJAM-A的相互作用，揭示表面纤突在基因II型GCRV侵染细胞过程中的作用，为基因II型GCRV 基因工程疫苗研制和药物治疗的分子靶位提供依据。具体实施研究中，利用蛋白质组方法成功鉴定出流行基因型II型GCRV主要结构蛋白，并进行了主要结构蛋白的验证。完成GCRV推测感染受体JAM-A、Lam R在敏感实验动物稀有鮈鲫中组织分布，受体的组织分布与病毒组织嗜性存在一定相关性，但受体在病毒感染前后的组织表达量未发现明显规律。过表达GcJAM-A和Lam R，单独转染Lam R真核质粒、GcJAM-A真核质粒或共转染GcJAM-A和Lam R真核质粒可以不同程度提高病毒的感染滴度。采用siRNA敲降Lam R，细胞中GCRV拷贝数明显下降。基因II型作为目前流行基因型，相关基础研究和应用研究都处于起步阶段，本研究中构建了基因II型GCRV蛋白组和转录组数据库，为后续感染机制研究和疫苗筛选提供了重要参考。本研究揭示了细胞表面GcJAM-A和Lam R在病毒入侵过程中，两个蛋白存在协同作用，具体研究机制有待于进一步深入研究。