柑橘NCED基因功能验证及其启动子干旱应答顺式作用元件解析

枳是主要的柑橘砧木，但不抗旱，发掘重要的基因资源对枳抗旱遗传工程具有重要意义。脱落酸（ABA）积累是植物应答干旱的重要机制，9-顺式-环氧内胡萝卜素双加氧酶（NCED）基因在干旱下ABA合成及抗旱中起关键作用。我们从Cleopatra柑（Citrus reshni）中克隆到受干旱诱导的NCED基因，本研究将它转入拟南芥野生型和129B08/nced3突变体，结合编码酶的活性分析，验证该基因的抗旱功能。此外，克隆该基因启动子并分析干旱应答相关的顺式作用元件，然后构建不同的缺失载体，转化野生型拟南芥，对转基因植株施以干旱处理，经GUS组织化学染色和活性分析后，确定该启动子上干旱应答的关键顺式作用元件。本项目的开展，旨在为今后通过遗传工程创造抗旱新种质提供具有自主知识产权的基因，同时为今后阐明NCED基因受干旱诱导的分子机制、克隆上游的调节因子等研究奠定基础，因而具有理论和实践双重意义。