EPO上调血浆中包含miR-144的微囊泡保护肾小管基底膜完整性的机制研究

Chronic kidney disease is characterized by tubulointerstitial fibrosis. Disruption of the integrity of tubular basement membrane (TBM) contributes to renal fibrosis. Erythropoietin (EPO) attenuates renal fibrosis; however, the mechanism remains unknown. It was reported that serum miR-144 was up-regulated after EPO. Most of the serum miRNAs are found in microvesicle. tPA is the target of miR-144. Here, in UUO model and cultured fibroblast, miR-144 level in serum microvesicles will be evaluated after EPO administration. The effect of miR-144-containing microvesicle on tPA/MMP9 expression and activity will be investigated. Further, regulation mechanism of miR-144 on tPA expression will be determined. The aim of this study is to investigate whether EPO protects the integrity of TBM by up-regulating serum level of miR-144-containing microvesicles, which then inhibit the expression and activity of tPA/MMP9 in fibroblast.

肾间质纤维化是慢性肾脏病进展的显著特征，肾小管基底膜完整性的破坏在肾脏纤维化过程中发挥关键作用。组织纤溶酶原激活剂(tPA)/基质金属蛋白酶9(MMP9)是调节基底膜完整性的重要因素。促红细胞生成素(EPO)能延缓肾脏纤维化，但其机制不明。有研究发现，EPO能上调血浆miR-144的水平，而血浆中的miRNA大都存在于微囊泡中，miR-144的靶基因是tPA。本项目以单侧输尿管梗阻(UUO)的肾组织和肾间质成纤维细胞为研究对象，观察EPO注射后血浆中包含miR-144的微囊泡含量的变化，以及包含miR-144的微囊泡对活化的成纤维细胞中tPA/MMP9的表达和活性的影响，并研究miR-144对tPA的调控机制，探讨EPO是否通过上调血浆中包含miR-144的微囊泡，抑制成纤维细胞tPA/MMP9的表达和活性，进而保护小管基底膜的完整性，延缓肾组织纤维化。

肾间质纤维化是慢性肾脏病进展的显著特征，肾小管基底膜完整性的破坏在肾脏纤维化过程中发挥关键作用。组织纤溶酶原激活剂(tPA)/基质金属蛋白酶9(MMP9)是调节基底膜完整性的重要因素。促红细胞生成素(EPO)能延缓肾脏纤维化，但其机制不明。本项目以慢性肾小管间质纤维化的患者、单侧输尿管梗阻(UUO)的小鼠肾组织和培养的肾间质成纤维细胞为研究对象，结果发现，EPO能上调人和小鼠血浆miR-144的水平，并且miR-144主要存在于而血浆微囊泡中，miR-144的靶基因是tPA，包含miR-144的微囊泡抑制活化的成纤维细胞中tPA/MMP9的表达和活性，进而保护小管基底膜的完整性，延缓肾组织纤维化的进展。进一步研究发现，EPO通过激活骨髓来源细胞，使之分泌包含miR-144的微囊泡，经过循环作用于肾间质成纤维细胞，发挥上述肾脏保护作用。综上所述，EPO激活骨髓来源细胞分泌miR-144，并通过微囊泡介导的细胞间通讯，调节肾间质成纤维细胞中tPA的表达和MMP9的活性，从而保护肾小管基底膜的完整性并减轻肾间质纤维化。本研究将有助于人们发现新的治疗慢性肾脏病的方法并为之提供理论依据。