丹参、川芎活性物质配伍方的多成分药物代谢动力学与对脑缺血性损伤保护作用的相关性研究

In pharmacokinetics (PK) process, the essence of Traditional Chinese Medicine prescription compatibility is a combination of a variety of chemical compositions medication, which exists components interaction in vivo. Traditional Chinese Medicine PK usually apply basic drugs ( single component ) PK model, which cannot integrate multiple components PK parameters and cannot analyze components interaction..Content: Take salvia miltiorrhiza and ligusticum wallichii（Shenxiong）compatibility for demonstration, combinate the main active material compatibility party, assay the pharmacokinetics(PK) and fingerprint（FP） of various representative compositions ( protocatechuic aldehyde, ligustrazine etc.) from blood and brain microdialysis samples which from cerebral ischemic injured rats after oral administration, simultaneously analyse drug absorption (Caco-2 cells) and transformation with HPLC, LC/MS etc. based on the correlation between pharmacokinetics and pharmacodynamics. Synchronous dynamic measure the pharmacodynamics corresponded to Shenxiong PK (neurological deficits, thrombosis, fibrinolysis, Glu, free radical damage, cerebral blood flow, neuronal apoptosis etc.). Then analysing PK and PD of Shenxiong multiple components with stepwise multiple linear regression, artificial neural network and rosenblueth etc.to constructe the PK, FP, PD, PK-PD, FP-PD model of multi components, and to explore the Shenxiong's main and auxiliary, the optimum compatibility and administration principle..Significance: Describe the law of Shenxiong compatibility; Construct new methods of multi components compatibility of prescription, pharmacokinetics research and evaluation.

中医方剂配伍实质是多种化学成分组合用药，存在着成分体内相互作用，发生在药代（PK）过程中。中药PK多套用基础药物（单成分）PK模型，但其不能整合多成分PK参数、分析成分相互作用。.内容：以丹参与川芎（参芎）配伍为示范，组合主要活性物质配伍方，基于药物代谢及其与药效学相关，以HPLC、LC/MS等测定各配伍方在脑缺血再灌注损伤大鼠口服给药后血、脑微透析样品多种成分（原儿茶醛、川芎嗪等）代谢变化（PK）、指纹图谱（FP），并结合分析药物吸收（Caco-2细胞）、转化；同步动态测定与参芎PK相应药效（神经功能缺损、血栓、纤溶、Glu、自由基损伤、脑显像、神经元凋亡等）。逐步多元线性回归、人工神经网络、统计矩等对参芎多成分代谢与药效分析，构建多成分PK 、FP、PD、PK-PD、FP-PD模型，并探讨参芎主辅、最佳配伍及给药原则。.意义：阐述参芎配伍规律；构建方剂多成分配伍、药代研究与评价新方法。

中医方剂配伍存在着药物相互作用，药代动力学（PK）与药效动力学（PD）可反映药物相互作用。本项主要是以参芎配伍为示范，结合参芎注射液组方，基于药物相互作用原理，构建中药多成分特征PK-PD模型，探讨参芎配伍机制，逐步建立中药配伍研究的新方法。现已按研究计划，经四年研究完成了研究任务，取得了较好成果。.主要内容和重要成果：采用高效液相色谱，结合正交、大孔树脂等方法制备丹参、川芎有效部位、有效成分，如丹参素、丹酚酸B、藁本内酯、阿魏酸等；MCAO法制作大鼠脑缺血再灌注损伤、内皮细胞糖氧剥夺（OGD）等模型，检测多项指标，如神经功能缺损、脑梗死体积、MDA、SOD、LDH、IL-1β、TNF-α、细胞凋亡等，表明参芎注射液及有效部位、有效成分不同比例配伍对脑缺血再灌注损伤或缺血缺氧所致的动物、细胞损伤等均具有较好的保护作用；采用HPLC、LC-MS等开展参芎有效部位、有效成分不同比例配伍在细胞转运及代谢特征分析，配伍后动态同步测定血中药效学和药动学数据，通过参数估计，运用数值分析理论等，开展药动学-药效学相关性研究、PK-PD联合数学模型构建及计算机转化，探讨组分配伍规律及中医药配伍生药间主辅等配伍地位。.本项目基于药物代谢及其与药效学相关，遵循中医方剂配伍理论和药物相互作用原理，阐述参芎配伍规律、相互作用机理、以及对脑缺血性损伤保护机制，探讨中医方剂配伍理论的内涵，为临床使用参芎配伍提供可靠思路与方法。构建方剂多成分配伍、药代研究与评价新方法。寻求治疗脑梗死的最佳参芎多种活性物质配伍方，为新一代组分中药制剂研发提供方法学参考。.现已将相关研究成果整理撰写发表相关科研论文，正式发表32 篇，其中SCI 收录5篇，会议交流论文5篇（均带标注）；浙江省科学技术进步奖二等奖1项，浙江省中医药科学技术奖一等奖1项，浙江省中医药科学技术奖二等奖1项；获国家发明专利授权1项；出版专著4部；项目负责人入选为2014年度省151人才工程重点资助培养人员，项目负责人浙江省卫生创新人才培养对象培养期满综合考评合格，项目组成员入选浙江省“新世纪151人才工程”第二层次培养人员1人次；培养硕士研究生9名；参加国内外学术交流50 余人次。