hnRNPK在非小细胞肺癌发生和细胞凋亡中作用机制的研究

Lung cancer has been the most malignant tumor with no effective therapy in China. Lacking of ideal animal models is one the most important reason for the slow progress in the research of lung cancer. So it is necessary to build proper lung cancer animal model to study the pathogeny and find effective treatment. hnRNPK has a high expression in lung cancer cells and promote cell proliferation via modulation of Ras pathway; while knock-out hnRNPK could lead to the apoptosis of cancer cell, which suggests its significant effect on the lung carcinogenesis. In this proposal, hnRNPK will be specifically silenced in human lung cancer cells to check the effect of the expression on proliferation and apoptosis of lung cancer. Meanwhile, hnRNPK was chosen as the gene target, transgenic mice with lung-specific knock-out will be produced with CRISPR/cas9 system. Studies on the gene-modified mouse models will be carried out on pathological characterization, observation on tumor genesis and development with mouse lung cancer cells. Parallel studies on human lung cancer cells will be carried out to confirm the effect of hnRNPK on lung carcinogenesis and apoptosis. Thus, this lung cancer mouse models and mechanism analysis will provide theoretical support and experimental basis to the drug targeting hnRNPK and chemotherapy resistance mechanism.

肺癌已经成为我国发病率最高的恶性肿瘤，尚无有效的治疗办法。缺乏理想的动物模型是导致肺癌研究落后的重要原因之一。因此，建立合适的肺癌动物模型对于研究肺癌病因以及治疗方法方面有着重要意义。hnRNPK在肺癌中高表达，且通过调控Ras信号通路促进细胞增殖能力，靶向沉默该基因后，引起了肺癌细胞凋亡，提示其在肺癌发生中的重要作用。本项目拟首先在细胞水平靶向沉默hnRNPK，检测hnRNPK对肺癌发生发展及肺癌细胞凋亡的作用。并且通过CRISPR/cas9小鼠基因修饰平台，建立肺部特异性沉默的肺癌转基因小鼠模型，检验hnRNPK对鼠源肺癌的影响，并平行建立人肺癌细胞的小鼠模型，利用这两种模型验证hnRNPK对肺癌发生发展的影响，初步探讨hnRNPK对肺癌细胞凋亡可能的机制能够一方面为揭示hnRNPK对肺癌发生发展的作用补充模型，同时为研发针对HNRNPK的靶向药物、为化疗耐药等提供理论支持和实验依据。

肺癌已经成为我国发病率最高的恶性肿瘤，尚无有效的治疗办法。缺乏理想的动物模型是导致肺癌研究落后的重要原因之一。因此，建立合适的肺癌动物模型对于研究肺癌病因以及治疗方法方面有着重要意义。hnRNPK在肺癌中高表达，靶向沉默该基因后，引起了肺癌细胞凋亡，提示其在肺癌发生中的重要作用。本项目首先在细胞水平靶向沉默hnRNPK，检测hnRNPK对肺癌发生发展的作用。并且通过CRISPR/cas9技术，建立了肺部特异性沉默的肺癌转基因小鼠模型，检验hnRNPK对鼠源肺癌的影响，并平行建立人肺癌细胞的小鼠模型，初步探讨了hnRNPK对肺癌调控的机制，发现hnrnpk通过p53调控了DDR信号通路。本项目的重要结果主要体现在四种肺癌动物模型的建立。包括皮下移植肺癌模型、肺转移动物模型、利用cas9技术建立hnrnpk肺部特异性敲除小鼠模型、Dox诱导特定时间点肿瘤细胞敲除hnrnpk动物模型。这些模型的建立为肺癌发生发展的病因学研究及药物筛选、药效评价等提供了有力的工具。尤其是本项目所建立的利用Dox诱导敲除hnrnpk的动物模型，该模型能够实现特定时间点的基因敲除，对于hnrnpk等必需蛋白是非常必要的，能够为其他必需蛋白类的肿瘤模型的建立提供借鉴意义。