探索CD5L在脓毒症中的免疫调节机制

Sepsis, characterized by failed host defense which leads to multiple organ dysfunctions, is the major cause of death in patients with infection. However, the pathogenesis of sepsis is not yet fully understood. Our group has been focusing on the research on sepsis and during the process of last project, we clarified the importance of macrophage in sepsis. Meanwhile,the expression of CD5L, an apoptosis inhibitor of macrophage, was discovered to be significantly elevated in septic patients and mice. Administration of recombinant CD5L protein significantly decreases the survival rate of septic mice, with aggravated injury of multiple organs including lung, liver and kidney,which indicate that CD5L has adverse effects in sepsis with unclarified mechanisms,remaining to be further studied.. This study will confirm the adverse effect of CD5L in sepsis by animal survival experiments and in vitro experiments,and investigate the immuno-modulation mechanism of CD5L on sepsis by it’s regulation on inflammatory cells and cytokines further. The study would provide novel ideas for the exploration of pathogenic mechanisms and treatment strategies of sepsis, and it's of potential significance for the diagnosis and treatment for sepsis.

脓毒症是导致感染患者死亡的主要原因，宿主抗感染免疫失调导致的免疫应答紊乱是引起多器官功能障碍的始发因素，其发生的机制尚不清楚。本课题组致力于脓毒症相关研究，在完成上一个基金过程中我们发现巨噬细胞在对抗脓毒症中的重要作用，期间又发现巨噬细胞凋亡抑制因子CD5L在脓毒症中表达升高，给予重组CD5L蛋白的小鼠生存率显著降低，肺、肝、肾等脏器炎性损伤增加，提示CD5L在脓毒症中发挥损害作用，但具体机制不清，需要进一步研究。. 本研究拟通过小鼠生存率和体内实验，明确CD5L对脓毒症的损害效应，并从CD5L对炎症细胞和细胞因子的调控方面进一步探索CD5L在脓毒症免疫功能紊乱中的作用，阐明CD5L加重脓毒症的具体免疫调控机制，为脓毒症致病机制及治疗策略研究提供新的思路，对脓毒症的诊断、治疗具有潜在的意义。

宿主抗感染免疫失调引起的多器官功能障碍在脓毒症的发病进程中起关键作用，但机制不清。多项研究已证实，一种新型免疫调控分子，巨噬细胞凋亡抑制蛋白（CD5L/AIM）可识别细菌和真菌组分，抑制其介导的 TNF-α等炎症因子的释放，并调节巨噬细胞的功能，进而在感染性炎症应答中发挥重要作用。我们初期研究发现，CD5L在脓毒症患者和脓毒症小鼠血清中的表达显著升高；进一发现rmCD5L处理能显著降低脓毒症小鼠的生存率，提示CD5L在脓毒症中发挥免疫损害作用。因此，本项目主要通过临床研究探索CD5L是否在脓毒症的诊断、预后或监测中发挥作用，并进一步通过动物实验和细胞实验，明确CD5L通过细菌清除和炎症调控在脓毒症中发挥免疫损害作用的分子机制。本项目的主要发现为：1. CD5L在脓毒症患者中的表达显著升高，并与反映疾病严重程度的SOFA评分呈正相关，且升高的CD5L至少可持续至患者入院后的第28天；通过ROC曲线分析比较发现，相比于PCT,CRP,IL-27,IL-10及SOFA，CD5L的曲线下面积（0.86），敏感性（88.57%），特异性（68.70%），尤登指数（57.27%），阳性预测值（46.31%）及阴性预测值（95.22%）均最高；进一步通过Kaplan-Meier生存曲线分析发现，患者入院当天CD5L浓度越高（>543.66 ng/mL），其28天死亡率越高，提示CD5L可作为生物标志物在脓毒症的诊断、预后和监测中发挥重要作用。2. CD5L在脓毒症小鼠中的表达量显著升高，并与脓毒症的疾病严重程度呈正相关。rmCD5L处理可显著降低脓毒症小鼠生存率、增加其细菌载量、加重其多器官损伤，这主要通过两个方面来实现。在脓毒症早期， rmCD5L处理可显著提升脓毒症小鼠PLF和外周血中的细胞因子TNF-α、IL-6及趋化因子CCL2的表达，及炎症细胞的浸润，扩大机体炎症反应，加重其多器官功能的损伤；在脓毒症后期，CD5L通过促进炎症细胞中IL-10的产生造成机体的免疫抑制状态，从而损害机体的细菌清除能力。本研究为脓毒症的诊断、预后和监测提供了新的理论基础，也挖掘了CD5L抗体作为脓毒症潜在的治疗靶点的价值，同时也为探索CD5L在其他炎症性疾病中的作用提供了新思路。