NDRG2在缺氧加重肝纤维化机制中的作用及干预策略

介入栓塞治疗已被公认是不能手术切除肝癌的首选方法，但反复介入栓塞后，大部分伴有肝硬化的肝癌患者出现肝纤维化程度进行性加重，严重影响了肝癌介入栓塞治疗的远期疗效。研究表明栓塞所致的组织缺氧是加重肝纤维化最重要的因素之一，但具体作用机制尚不明确，同时缺乏有效的防治手段。NDRG2是新近发现的抑癌候选基因，亦是受缺氧调控的靶基因；而肝星形细胞(HSC)的活化是肝纤维化加重进展的细胞学基础。我们发现腺病毒NDRG2感染HSC后可拮抗TGF-β1的促HSC侵袭的作用，降低活化标志物α-SMA的表达，故我们提出：NDRG2可能在缺氧加重肝纤维化机制中起关键作用。本项目拟通过细胞、动物模型及临床标本观察，科学评价NDRG2在缺氧加重肝纤维化过程中的作用，阐明其分子作用机制，并设计相应的干预策略，在动物模型中评价其干预防治效果。本项目的开展对于提高伴肝硬化的肝癌患者的介入栓塞疗效及生存期具有重要临床意义。

肝癌病人经过反复介入栓塞治疗后，大部分伴有肝硬化的患者出现肝纤维化程度进行性加重的现象，严重影响肝癌介入治疗的远期疗效；研究表明栓塞所致的组织缺氧是加重肝纤维化的最重要因素之一，但具体机制尚不明确；据文献报道，NDRG2不仅是新发现的抑癌候选基因，亦是缺氧调控的靶基因，腺病毒NDRG2感染HSC后可拮抗TGF-β1的促HSC侵袭作用，降低活化标志物α-SMA的表达。也就是说NDRG2有可能通过拮抗TGF-β1而影响肝纤维化。研究表明NDRG2是缺氧诱导因子HIF-1的靶基因，故NDRG2可能是缺氧加重肝纤维化过程中调节HSC活化的新关键分子。缺氧诱导肝纤维化加重的细胞学基础及其分子作用机制，是本项目首先要解决的科学问题。证明此过程中NDRG2表达↓与TGF-β1表达↑，阐明其内在机制及两者间的相互作用关系，是系统阐明缺氧诱导肝纤维化加重的具体分子机制的关键环节。另外，建立减缓甚至逆转介入治疗后肝纤维化进展的有效干预治疗策略是本项目另一个目标。.课题目前取得的实验结论：1. 动物实验表明NDRG2分子参与到缺氧诱导肝纤维化的进程中，2. 细胞实验表明缺氧可以诱导NDRG2分子表达下调，3. LX-2细胞缺氧实验表明NDRG2分子与TGF-ß1分子表达存在拮抗效应，4. 细胞和动物实验表明上调NDRG2分子表达水平可以影响肝纤维化的进展。.本项目通过临床标本的检测，明确了NDRG2与TGF-β1的内在表达联系，并利用细胞模型进行基因调控以观察两者的表达变化的关系，初步阐明缺氧→NDRG2↓→TGF-β1↑→HSC活化↑的因果关系。我们以NDRG2为靶点，利用基因调控手段过表达NDRG2，在动物模型中观察到其拮抗TGF-β1的作用，具有干预缺氧加重肝纤维化进展的效果。本项目初步明确了缺氧刺激下NDRG2对HSC细胞活化的调节机制，为系统阐明缺氧诱导肝纤维化加重的分子机制奠定基础，进而可设计针对NDRG2分子的干预措施，以期将来可用于降低肝癌介入后肝纤维化加重的发生率，提高患者生存质量和远期疗效。