抗肝纤维化中药有效组分复方"CKJ"的主要作用机理和配伍特点研究

在前期开展的"基于均匀设计和扶正化瘀胶囊的抗肝纤维化中药有效组分复方研究"发现虫草多糖、苦杏仁甙、绞股兰总皂苷三种有效组分的特定配比组方（简称"CKJ"）有非常理想的抗实验性肝纤维化效应，疗效显著优于单一组分并与扶正化瘀胶囊相当的研究成果基础上，进一步围绕肝纤维化的关键病理机制，进行CKJ方的作用机理研究。分别采用DMN和CCl4诱导的两种经典的大鼠肝纤维化整体动物模型，以及体外人肝星状细胞株（LX-2），围绕肝脏炎症细胞因子、过氧化损伤、肝星状细胞活化、胶原合成与分解、细胞凋亡等重要环节，从整体、细胞、分子水平，比较分析CKJ方与各个单一组分在不同药理途径和环节上的作用特点和协同作用点，剖析和揭示中药有效组分复方配伍意义。为探索寓中医药理论内涵，有复方多途径综合作用特点，以活性物质群配伍形成，可提高制剂质量的可控性、稳定性，并可进一步提高疗效的抗肝纤维化中药制剂提供坚实的理论依据。

本课题在既往通过均匀设计方法发现虫草多糖、苦杏仁甙、绞股兰总皂苷三种有效组分的特定配比组方（简称CKJ）有极理想的抗实验性肝纤维化效应基础上，进一步围绕肝纤维化的关键病理机制，研究CKJ方的作用机理。分别采用DMN和CCl4诱导的两种经典大鼠肝纤维化整体动物模型，以及体外人原代肝星状细胞，围绕肝脏炎症细胞因子、过氧化损伤、肝星状细胞活化、胶原合成与分解、细胞凋亡等重要环节，从整体、细胞、分子水平，比较分析CKJ方与各单一组分在不同药理途径和环节上作用特点和协同作用点，剖析和揭示中药有效组分复方配伍意义。.　　研究工作顺利完成，达到预期目标。已发表和录用的项目标注论文9篇（其中SCI收录1篇，PubMed收录3篇）；获得专利授权1项；培养研究生4名。CKJ方于2012年入选国家十二五科技重大专项重大新药创制的候选药项目研究。.　　综合两种大鼠肝纤维化模型研究的共性结果和体外研究结果，表明有效组分复方CKJ方抗肝纤维化作用显著强于单一组分，其作用环节经比较分析表明：（1）CKJ方多途径综合药理效应：①作用于肝纤维化中心环节——抑制肝星状细胞活化。可降低肝星状细胞活化标志—α-SMA的表达，并经体外原代培养肝星状细胞和LX2细胞实验研究证实；②作用于肝纤维化发生发展过程中的关键细胞因子TGF-β1及其受体（TβR）和Smads信号通路。可下调TGF-β1、TβR-I及其p-Smad2及p-Smad3蛋白表达；③影响胶原酶系统，抑制胶原合成促进胶原降解。可显著降低肝组织MMP-2/9活性，下调TIMP-1及TIMP-2的蛋白表达；④抗脂质过氧化；⑤促进肝再生。（2）单一用药作用点较局限：虫草多糖、绞股蓝总皂甙均主要作用于星状细胞活化和TGF-β1/Smad通路环节。.　　研究获得总体结论：（1）CKJ方有抑制肝星状细胞活化、调节TGF-β1/TβR/Smads信号传导通路、调节胶原合成及分解代谢、及抗脂质过氧化和促进肝细胞再生等多途径的综合药理作用，较方中各单一组分有整体、综合性药理优势；（2）基于中药传统复方理念的有效组分的合理配伍，不仅可配伍增效，还可配伍生效，重现传统中药复方多途径药理作用的综合优势特点。.　　本课题的完成为探索寓中医药理论内涵、复方多途径综合作用特点及活性物质群配伍形成，提升制剂质量的可控性、稳定性，为提高抗肝纤维化中药制剂疗效提供重要科学依据。