针刺对实验性近视豚鼠视皮层神经递质及相关受体表达影响的研究

我国现已成为世界第一近视大国，以近视为主的中小学生视力低下正向低龄化发展，如何保障青少年视觉健康已成为重大的社会与医学问题。我们在大量的临床实践和近视综合防治研究中发现，针刺虽然不能降低部分近视患者的屈光度，但却可以明显提高视力。有研究表明针刺可以通过改善"脑视力（neurovision）"来提高患者视力。本研究旨在前期研究基础上，通过建立实验性近视动物模型，给予相关穴位电针刺激，采用实时在线活体微透析和高效液相法检测视皮层5-羟色胺（5-HT）、多巴胺(DA)含量；免疫组化法以及实时荧光定量PCR检测视皮层5-HT、DA、NGF（TrkA）和神经型nNOS等受体的分布和表达情况，分析电针对视皮层细胞相关信号通路的影响；基因芯片法检测视皮层细胞基因表达谱的变化，以探讨针刺提高脑视力的作用机理，为针刺改善近视患者视觉质量奠定理论基础。

目前，近视已成为危害我国青少年视觉健康的最主要疾病，已成为广受关注的社会与医学问题。但是，目前国内外对青少年近视的病因和发病机制仍不十分清楚，尤其是西医缺乏有效预防和治疗手段。中医针灸疗法治疗近视在提高视力等方面具有独特优势，但这种视功能的改善并不是通过改变屈光度来实现的，其具体机制尚未阐明。本研究就是通过分析针灸对大脑视觉中枢和视网膜的神经递质等的影响，探讨针灸治疗近视的确切机制。.1. 通过建立透镜诱导型近视豚鼠模型，给予电针穴位刺激，分析针刺对近视眼屈光度和视力的确切影响。结果发现，电针并不能影响近视发展过程中屈光度和眼轴等生物学参数的变化。本研究首次成功利用行为学训练方法检测了豚鼠的视力，优化并形成了一套检测方案，研究证实电针可以提高近视豚鼠的行为学视力。.2. 参考大鼠脑立体定位图谱，采用解剖学方法确定豚鼠视皮层的立体定位坐标。利用微透析和视皮层取材研磨等方法收集大脑皮层样本，HPLC法检测各神经递质的含量和变化规律。研究发现，电针刺激对近视豚鼠视皮层单胺类神经递质无显著影响，而主要通过调控谷氨酸和γ-氨基丁酸等氨基酸类神经递质影响视力。.3. 研究针刺对视网膜信号通路的影响并分析其与视力的关系。结果发现视网膜中谷氨酸、γ-氨基丁酸在近视发生发展中发挥着关键作用；同时还首次发现针刺能够改善近视豚鼠闪光视网膜电图表现。.4. 本部分对透镜诱导后近视眼后极部的巩膜胶原进行了研究，通过观察后极部巩膜干重、厚度和羟脯氨酸的代谢变化发现，随着透镜诱导时间的延长，后极部巩膜干重逐渐降低，同时伴有巩膜厚度逐渐变薄，羟脯氨酸含量减少，以上均提示透镜诱导可使后巩膜胶原合成减少，分解增加。.5. 首次利用基因芯片技术研究电针穴位对透镜诱导型近视豚鼠视皮层中基因表达谱的变化情况。发现针刺治疗后可上调视皮层 Actl7b的表达，下调Rock1，Lyrm5，membrane magnesium transporter 1-like等的表达，提示这些基因可能参与调控近视的发生与发展。.本研究在针灸治疗近视的大脑视觉中枢机制方面进行了初步尝试，发现了关键神经递质；同时还在实验动物视力检测、皮层定位、视网膜神经递质及电活动的改变等相关领域进行了创新性研究。本研究将有助于更加深入地认识近视的病因病机和针灸的治疗机制，丰富中医眼科与针灸基础理论，为更加深入的研究以及指导临床工作打下良好基础。