利用分子探针探索造血干细胞自我更新的信号传导机制

造血干细胞（HSC）是目前在临床常规应用的唯一一类干细胞，然而临床病人的HSC移植，还面临巨大挑战。例如，从人脐带血采集的HSC的总量还不能充分满足成年病人的需求，这就限制了HSC的广泛应用。目前HSC的获取途径主要是通过逆转录病毒介导表达的方法，即引入对HSC的扩增有正向调控作用的正性调节因子如HoxB4, Bmi-1, 或 β-catenin，而这种方法有诱发白血病的高风险。而p18是HSC的负向调控因子，而且是已知的所有CKIs中对HSC自我更新抑制作用最强的蛋白，因此P18是靶向干细胞扩增的独特的靶点。在本研究中，我们将以p18为靶点，设计并筛选对p18功能有特异阻断作用的小分子化合物，以此为分子探针，特异性的阻断p18 与CDK6 的结合，进而研究HSC的自我更新、p18降调节及Notch途径激活之间的关系，同时也为干细胞治疗的药物设计提供新的途径。

HSC是目前在临床常规应用的唯一一类干细胞，然而临床病人的HSC移植，还面临巨大挑战。例如，从人脐带血采集的HSC的总量还不能充分满足成年病人的需求，这就限制了HSC的广泛应用。目前HSC的获取途径主要是通过逆转录病毒介导表达的方法，即引入对HSC的扩增有正向调控作用的正性调节因子如HoxB4, Bmi-1, 或 β-catenin，而这种方法有诱发白血病的高风险。而p18是是HSC的负向调控因子，而且是已知的所有CKIs中对HSC自我更新抑制作用最强的蛋白，因此P18是靶向干细胞扩增的独一无二的靶点。本研究中，我们以p18为靶点，设计并筛选了2个对p18功能有特异阻断作用的小分子化合物，通过体外长周期培养实验及体内竞争性骨髓移植实验证实，阳性化合物可以在体外有效扩增HSC。以此为分子探针，进而在单细胞水平研究了p18对造血的调控作用。不仅如此，通过此研究我们还建立了一整套利用小鼠造血干细胞筛选评价先导化合物促进干细胞活性及安全性的方法，为其它化合物的筛选提供了可借鉴的技术平台，同时也为干细胞治疗的药物设计提供新的途径。