伪狂犬病毒基因疫苗研究

通过酶切、改造、亚克隆，获得了伪狂犬病病毒鄂A株含编码区的完整gD基因，构建了测序质粒；利用双脱氧终止法测定了gD基因序列，，并与国外Rice株相比，发现鄂A株gD基因在核苷酸水平和氨基酸残基水平上都存在差异。将gD基因分别与真核表达载体pCI-neo 和pcDNA3.1(+)连接，构建真核表达载体，转染BHK-21细胞，免疫荧光试验表明gD基因均得到很好表达。用这两种质粒免疫Balb/c小白鼠、家兔和仔猪，用ELISA检测，说明小白鼠产生了伪狂犬病抗体，加强免疫后抗体增加一个滴度；中和试验结果表明家兔和仔猪均产生中和抗体，攻毒后均获得保护。此外，还构建了gB、gC基因的真核表达载体，为进一步探讨gD、gB、gC等基因在基因免疫中的单独或联合作用奠定了基础。