圆滑番荔枝抑制胡椒瘟病菌活性成分及作用机理研究

Annona glabra is a member of the Annonaceae family,which has high antifungal activity obtained by our project team.Previous study shows that plant extracts have high antifungal activity to Phytophthora capsici,Phytophthoranicotianae(P. parasitice) and Colletotrichum gloeosporioides.Using ethyl acetate extract the leaf ethanol extracts,the inhibition rate reached 74.43% to Phytophthora capsici ,that may be the main activity part among the other solvent extract part.To further study this part antifungal compounds,this project using activity tracking method to isolate antifungal activity compounds from ethyl acetate extracts.That chemical structure are identified by conventional and spectroscopic techniques.Comparison the compounds antifungal activity.To investigate the high antifungal cmmpounds mechanism by pathogenic form, mycelium cell ultrastructure，conidial germination and some protective enzyme changes. Implementation of this project have great significance to pepper blast comprehensive control、pepper industrial safety and tropical plants resource development and utilization.

圆滑番荔枝为番荔枝科番荔枝属植物，是项目组前期筛选获得的高抑菌活性植物。前期研究表明，圆滑番荔枝提取物对胡椒瘟病菌、香草兰疫病菌和芒果炭疽病菌具有很强的抑菌活性，其叶乙醇提取物乙酸乙酯萃取组分对胡椒瘟病菌的抑菌活性较高，抑制率达到了74.43%，可能为其主要的活性部位。为了进一步研究该植物抑菌活性成分，本项目拟通过活性跟踪法，从圆滑番荔枝乙酸乙酯萃取物中分离对胡椒瘟病菌具有抑菌活性的化合物，通过常规结构鉴定和波谱学技术明确活性成分化学结构；比较各活性成分间的抑菌活性强度，明确主要的抑菌活性物质；并通过研究高活性成分对供试病原菌形态、菌丝细胞内超微结构变化、孢子萌发及病原菌几种保护酶活性的影响，探讨高活性成分的抑菌作用机理。本项目的实施对胡椒瘟病综合防治、胡椒产业发展以及热带植物资源开发利用均具有重要意义。

胡椒瘟病是由疫霉菌侵染引起的一种传染力很强的土传性病害，一直是威胁胡椒产业发展的首要病害，项目组前期研究发现圆滑番荔枝提取物对胡椒瘟病菌具有较高抑菌活性，但具体抑菌活性成分及抑菌作用机理尚不明确。本项目采用硅胶柱层析等层析技术从圆滑番荔枝叶乙醇提取物乙酸乙酯萃取组分中分离纯化得到对胡椒瘟病菌具有抑菌活性的化合物2种，通过核磁共振和GC-MS等检测方法明确了2种化合物分别为棕榈酸酰胺和滨蒿内酯，其中棕榈酸酰胺对胡椒瘟病菌的抑菌活性较高达到了61.03%，滨蒿内酯的抑菌活性较低仅为14.81%；通过观察测定棕榈酸酰胺对胡椒瘟病菌菌丝形态、细胞内超微结构及几种保护酶的影响，发现棕榈酸酰胺处理后胡椒瘟病菌菌丝干瘪、皱缩、细胞内容物减少、出现大量空腔，SOD、CAT、POD三种保护酶活性均表现出不同程度的降低等，这些变化表明棕榈酸酰胺具有破坏胡椒瘟病菌菌丝膜系统、细胞器等能力，从而达到抑制菌丝生长的作用。本项目的研究结果为进一步结构修饰合成更高活性抑菌化合物奠定了理论基础，对开发研制防治胡椒瘟病的植物源杀菌剂、胡椒产业发展以及热带植物资源开发利用均具有重要意义。