刀孢轮枝菌侵染线虫的分子机理和高效线虫生防工程菌的构建

本项目以前期研究中获得的对植物寄生线虫具有高侵染力的刀孢轮枝菌为材料，通过同源重组技术敲除其主要的毒力因子丝氨酸蛋白酶（Ver112）编码基因, 分析蛋白酶缺失突变菌株对线虫的侵染活性及其它的毒力因子在侵染过程中的作用。并构建Ti重组质粒pPK2-Ver112, 利用根癌农杆菌介导转化技术把蛋白酶（Ver112）编码基因转入刀孢轮枝菌和线虫生防真菌厚垣普可尼亚菌, 利用潮霉素作为抗性筛选标记，获得丝氨酸蛋白酶同源和异源表达的工程菌株，分析工程菌侵染线虫活性的变化以及工程菌蛋白酶表达量和杀线虫活性的相关性。诠释刀孢轮枝菌侵染线虫的分子机制，探索高效线虫生防工程菌构建的关键技术，解决线虫生防制剂在实际应用中防效低下的问题。