慢性鼻-鼻窦炎糖皮质激素抵抗的信号转导机制研究及干预初探

慢性鼻-鼻窦炎（CRS）糖皮质激素（GC）抵抗的机制未明，反复复发和病情迁延的难题无法回避，临床上缺乏有效的治疗手段，迫切需要在病理机制研究上有突破性进展。我们大量的前期研究业已证实GC抵抗性CRS黏膜中糖皮质激素受体（GR）亚型表达异常，多个信号通路与GR的异常表达相关。由此，我们首次提出多通路构成的信号转导网络的异常调节可能是GR异常表达和GC抵抗的新机制。本项目拟从体内和体外两个层面，采用小RNA干扰技术及定量蛋白质和核酸检测等方法，筛选探明CRS中参与GC抵抗调控的信号转导网络构架，揭示该网络中各通路之间的相互关系及调节或阻断某一信号通路对GR、GC敏感性和网络中其它通路的影响。进而在临床中观察针对信号网络调节的治疗对GC敏感性的影响。以期阐明GC抵抗性CRS特异性的信号转导网络及其调控机制，获取改善GC敏感性的治疗经验，为提出信号转导网络作为CRS治疗的新靶点提供科学依据。

慢性鼻-鼻窦炎（CRS）在人群中患病率较高，目前，糖皮质激素（GC）是治疗CRS的一线用药，但临床中观察到部分病例对GC治疗不敏感，其机制未明，值得深入探索。.最近的文献已证实在GC抵抗的鼻息肉组织中糖皮质激素受体（GR)β 和GRα 的表达比值高于GC敏感组和正常鼻黏膜组，提示GRα/GRβ降低可能是导致GC抵抗的重要因素；我们最近的研究提示MAPK家族和NF-κB信号通路可能参与了GR的信号转导。. 本研究采用IL-1β或LPS体外诱导人鼻黏膜上皮细胞（HNE）或鼻息肉组织构建糖皮质激素抵抗模型。以Westen blot及荧光定量PCR技术检测梯度浓度的IL-1β或LPS诱导前后及各个信号通路特异性抑制剂干预前后GRα、GRβ和p38MAPK、ERK、JNK及NF-κB信号通路关键酶在蛋白质及核酸水平的表达变化。结果发现：IL-1β或LPS可以呈浓度和时间依赖性诱导GRα/GRβ降低，成功建立GRα/GRβ降低的体外模型。相同浓度梯度的IL-1β或LPS可呈相同规律地诱导p38MAPK、ERK、JNK和NF-κB信号通路激活。p38MAPK通路的特异性抑制剂SB203580，JNK通路的特异性抑制剂SP600125和NF-κB通路的特异性抑制剂PDTC均可明显抑制各自信号通路，且同时出现GRα/GRβ增高，GC亲和力提高。与SP600125相比，SB203580干预后，GRα/GRβ增加更为明显。ERK，PI3K 或PKC通路特异性阻断剂干预后，GRα/GRβ未发现变化。SB203580或SP600125均可降低NF-κB亚基的表达；但是PDTC对phospho-p38MAPK或phospho-JNK 的表达未发现影响。以上结果提示：炎症因子诱导后，可能通过p38MAPK/NF-κB或JNK/NF-κB信号通路诱导GRα/GRβ降低，其中p38MAPK/NF-κB通路较为主要，针对上述信号通路的调节可能有助于改善糖皮质激素抵抗性鼻息肉的治疗效果。