乙肝病毒e抗原参与促进Th17细胞增多的机制研究

Multiple immune cells,including DCs,Kupffer cells, regulatory T cells and Th17 cells, can infiltrate the liver and actively participate in the immunepathogenesis in chronic hepatitis B (CHB). IL-17 produced by Th17 cells can directly function on IL-17R expressing cells and exacerbate the inflammatory microenvironment of the liver. The frequency of circulating and intrahepatic Th17 cells increased with disease progression from CHB and IL-10 concentrations were negatively correlated with the frequencies of Th17 cells.Toll like receptor 2 (TLR2） expression on hepatocytes and Kupffer cells was significantly reduced in HBeAg-positive CHB. TLR2 signalling is crucial for the induction of IL-10 production by antigen presenting cells. In our previous work,HBeAg completely abrogated TLR-induced antiviral activity. Therefore, we made a hypothesis that HBeAg may suppress activation of TLR2 signaling pathway and downregulate IL-10 production. The decreased product of IL-10 may promote the Th17 cells response and accelerate the liver injury. In this project, we will confirm this hypothesis in hydrodynamic HBV mouse model and in CHB patients. The discoveries would elucidate new pathways of HBV-mediated liver damage and promise new targets of molecular therpeutic strategies for CHB.

乙肝病毒感染所致肝炎是多种类型免疫细胞参与的肝脏免疫损伤，其中Th17细胞通过分泌的IL-17等细胞因子加重肝脏损伤。HBeAg(+)慢性乙肝患者血清中和肝脏内Th17细胞明显增多；肝细胞和肝内Kupffer细胞的TLR2表达显著降低；血清中IL-10水平显著降低。我们的前期工作发现:HBeAg能通过干扰TLR信号通路来抑制非实质肝细胞产生I型干扰素和多种细胞因子。TLR2信号通路在抗原提呈细胞中负责IL-10的诱导分泌。因此我们提出假说：HBeAg通过抑制TLR2信号通路下调IL-10，而IL-10的浓度降低能负调控Th17细胞应答，促使Th17细胞数量增多，加重肝脏炎症。我们拟在HBeAg(+)和HBeAg(-)HBV感染的小鼠模型和慢性乙肝病人中，证实HBeAg参与促进Th17细胞增多的调控通路，为我们深入理解慢性乙肝的发病机制和发展有效的慢性乙肝治疗策略提供新的思路和实验依据。

HBV e抗原（HBeAg）具有免疫调节功能。前期的研究结果表明HBeAg会影响慢性乙肝的病程以及肝脏炎症的发展。本课题尝试从HBeAg抑制天然免疫应答中TLR2信号通路的角度来研究HBeAg与肝脏炎症发生间的相关性；特别是分析HBeAg是否通过调节肝内免疫状态，比如Treg细胞、Th17细胞参与调节肝脏炎症。本课题主要运用HBeAg(+)和HBeAg(-) HBV病毒株慢性复制的小鼠模型，以及HBeAg(+)和HBeAg(-)慢性乙肝患者的外周血PBMC标本，研究在HBV感染过程中HBeAg是否通过调节TLR信号通路改变IL-10等细胞因子的分泌；进一步探索HBeAg如何参与调控Treg细胞、Th17细胞应答，影响肝脏的免疫状态与炎症的进展。我们发现HBeAg的长期表达能抑制肝内TLR2的表达水平；HBeAg主要诱导肝内Th1型T细胞反应，以Treg细胞为主，起免疫负调控作用；当HBeAg表达缺失时，肝内CD8 T细胞反应增强，利于病毒的清除，炎症发生。HBeAg并不是通过调节IL-10的水平来参与Th17细胞的活化与肝脏炎症的发展。我们在不同小鼠模型中得出的实验结果提示：在机体不同的免疫背景下，HBeAg可以发挥免疫抑制或免疫活化不同的免疫调节功能。本课题的研究对我们深入理解慢性乙肝的发病机制，阐明乙肝发病机制中各种免疫细胞和细胞因子的相互作用有重要意义，为临床上分析HBeAg与肝脏损伤之间的关系提供新思路，为发展新型有效的慢性乙肝免疫治疗策略提供实验基础。