新基因CIAPIN1相互作用分子及其信号转导网络的研究

CIAPIN1是我科2000年发现的一个新的人类胃癌耐药相关基因，生物信息学分析未发现其具有任何已知的结构域或基序。在国家自然科学基金资助下（NO.30471989，已结题），我们初步的研究表明CIAPIN1在肿瘤发生、耐药与应激反应等生命活动中有一定作用，但对于CIAPIN1执行功能的分子机制和信号转导通路也尚不清楚。本项目将在我们上述工作基础上，利用酵母双杂交、免疫共沉淀、GST-Pulldown、TAP方法和飞行时间质谱研究CIAPIN1相互作用分子，借助基因芯片和抗体芯片寻找CIAPIN1下游调控分子；对所获得的高通量信息进行分析和归类，寻找CIAPIN1参与调节的其他通路，观察通路间的相互关联，研究CIAPIN1可能的信号传导网络，充分揭示CIAPIN1生物学功能，明确其执行功能的分子机制，为我们深入理解这个新基因的功能奠定理论基础。

CIAPIN1是我科2004年发现的一个新的人类胃癌耐药相关基因，其分子机制和信号转导通路也尚不清楚。本项目首先对CIAPIN1的相互作用分子进行了初步筛选；酵母双杂交实验有生物技术公司进行。在本研究中我们还建了CIAPIN1分子C末端融合表达TAP标签的真核表达载体，并通过质谱分析首次检测到了一个与CIAPIN1相互作用的分子――TXNL2。此外，利用2-DE和质谱鉴定技术获取了CIAPIN1的6个上调蛋白和2个下调蛋白，它们是P66、If-A20、Twist、IGHD、CACNA1B、GSDM1、IFT20和RGS，其中P66、RGS、Twist、CACNA1B、GSDM1和IGHD为CIAPIN1所上调，IFT20和If-A20为CIAPIN1所下调；利用基因芯片技术筛选到CIAPIN1上调的基因411个和下调的基因288个；第三Go分析CIAPIN1在胃癌内参与调节的前十个功能反应为：Response to wounding；Reproduction；Regulation of DNA recombination；Very-long-chain fatty acid metabolic process；Cell cycle checkpoint；DNA damage checkpoint.；S phase of mitotic cell cycle；M phase of mitotic cell cycle；Sulfur amino acid metabolic process；Pathway分析CIAPIN1在机体内共同的11条重要的信号通路：p53-Dependent G1 DNA Damage Response；Apoptotic cleavage of cell adhesion proteins；Signaling by Notch；mapkinase signaling pathway；Hypoxic and oxygen homeostasis regulation of HIF-1-alpha；Cell Cycle；PI3K/AKT signalling；Apoptosis；Ras signaling pathway.；Inhibition of matrix metalloproteinases；JAK-STAT pathway.