EB病毒感染的脐带血树突状细胞对Th17细胞活化及其机制的研究

EB病毒（EBV）是一种肿瘤源性病毒，在人群中广泛传播，可逃逸宿主的免疫监视。Th17细胞是近几年发现的新型CD4+T细胞，动物实验表明其在病毒逃逸宿主免疫监视中发挥重要作用，而已知树突状细胞（DC）可对Th17细胞的活化和功能产生影响。我们在已建立的EBV感染DC的实验体系基础上，拟将EBV感染的脐带血单核细胞来源DC与CD4+T细胞共培养，研究EBV感染DC对Th17细胞活化的影响并探讨Notch配体Dll4在其中的作用，以进一步阐明EBV感染逃逸宿主免疫监视的机制，为临床治疗EBV感染提供新思路。本项目特点：1.EBV感染DC对Th17细胞影响的研究国内外尚未见报道；2.利用的EBV感染的DC是一种未成熟DC；3.利用脐带血研究EBV感染，与成人外周血相比，更能揭示EBV感染所致的原始免疫系统发育和功能变化。因此本研究对防治EBV感染有重要意义。

目的：EB病毒（EBV）是一种肿瘤源性病毒，在人群中广泛传播，可逃逸宿主的免疫监视，其免疫逃逸的机制尚不明了。近年来的研究表明，可能与树突转细胞（DC）及Th17密切相关。本研究拟通过研究EBV感染的DC对Th17细胞活化和功能的影响，阐明EBV免疫逃逸的机制，以期为临床提供免疫干预的靶点。.　　　方法：用IL-4和GM-CSF诱导脐带血单核细胞向DC分化，分别在第0天和第5天用EBV感染DC，流式细胞术检测DC表型分子CD1a/CD11c/CD80/CD83/CD86/CD40、吞噬、凋亡功能，ELISA方法检测DC细胞因子IL-6/IL-10/IL-12/IFN-γ的表达；将诱导的DC与Th17共培养，研究①EBV感染的脐带血单核细胞来源DC对Th17细胞功能相关细胞因子分泌及相关表型的影响；②Notch配体Dll4在EBV感染的脐带血单核细胞来源DC与Th17细胞相互作用中的作用；③比较EBV感染的脐带血单核细胞来源DC对脐带血或成人外周血Th17细胞的影响有何不同。.　　　结果：EBV诱导的脐带血来源的DC是一种半成熟的DC，主要表现为高表达共刺激分子如CD40、CD80和CD86，而其细胞因子的表达水平却比较低，这种半成熟的DC主要与免疫耐受和免疫归巢密切相关；而EBV诱导的成人外周血来源的DC则是一种病原体驱使的调节性的未成熟的DC，同样高表达共刺激分子，而同时高表达细胞因子IL-10，低表达IL-12，而这种DC主要与免疫防御和免疫逃逸有关。另外，EBV诱导的脐带血来源的DC可通过EBV感染通过上调DC表面Notch配体Dll4（Delta-like 4）的表达，进而诱导了Th17细胞的活化，.　　　结论：EBV可诱导脐带血单核细胞来源半成熟DC的分化，而这种半成熟的DC可进一步诱导Th17细胞的生成和分化，这可能是EBV逃逸宿主免疫监视的机制之一。