藏药“阿夏塞尔郡”黄酮保肝活性成分及其作用机制研究

藏药"阿夏塞尔郡"为菊科打箭菊Pyrethrum tatsienense的干燥全草，具有清热解毒的功效，该药在藏族地区临床上广泛用于治疗痈热疫毒、肝炎，疗效确切，但有关其药理作用及活性成分相关研究极少见报道。前期研究发现其总黄酮具有显著的保肝作用，本项目拟在此基础上，采用肝损伤细胞模型及刀豆蛋白（Con A）诱导的免疫肝损伤动物模型进行活性示踪，进行打箭菊黄酮成分的系统分离和结构鉴定；采用Con A诱导的免疫肝损伤模型，从转氨酶活性（ALT、AST）、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量变化、肝组织免疫组化及其超微结构的影响等多环节对有效部位、有效成分肝损伤保护作用的免疫学机制进行系统研究；通过相关性的综合分析，系统阐明打箭菊肝损伤保护作用的药效物质基础及其作用机理，为寻找和开发慢性病毒性肝炎治疗新药和丰富藏医药内涵提供科学研究依据。

本项目自阿夏塞尔郡（打箭菊）活性部位中分离得到28个化合物，借助现代光谱学新技术以及有机化学相关技术确定了其中25个化合物的结构，主要包括黄酮类化合物（14个）、香豆素类化合物（4个）、酚类（5个）、甾体及其苷类化合物（2个），其中5个化合物为首次自该植物中获得。分别采用D-半乳糖（D-Gal）所致大鼠急性肝损伤和刀豆蛋白A (Con A) 诱导的免疫肝损伤模型，从转氨酶活性、肝组织及线粒体损伤、过氧化损伤及免疫调节因子等多环节对有效部位肝损伤保护作用的免疫学机制进行系统研究；结果显示打箭菊高、中、低剂量组血清ALT、AST活性均明显低于模型组，差异均有显著性意义(P<0.01)；打箭菊高、中剂量组血清ALT活性均明显低于联苯双酯治疗组，差异均有显著性意义(P<0.01、0.05)；同时，打箭菊高、中、低剂量组血清 ALT 活性、肝组织 MDA 含量均明显低于模型组，差异均有显著性意义(P<0.01)；与联苯双酯组、环磷酰胺对照组比较，差异均无显著性意义(P>0.05)。打箭菊高、中剂量组肝组织 SOD 活性均明显高于模型组(P<0.01)；打箭菊高剂量组与联苯双酯组、环磷酰胺对照组比较，差异均无显著性意义(P>0.05)；打箭菊高、中剂量组肝组织病理改变明显减轻，对Con A致小鼠免疫性肝损伤模型，具有较好的降低血清 ALT 水平作用，并可显著减轻肝组织病理改变，其抗肝损伤机制与抗脂质过氧化的损伤密切相关。。打箭菊对D-半乳糖（D-Gal）所致大鼠急性肝损伤和Con A所致小鼠免疫性肝损伤均具有较好的保护作用，其抗肝损伤机制与抗脂质过氧化的损伤、抑制单核-巨噬细胞活化、抑制IL-6过多的分泌以及TNF-α的产生密切相关，初步阐明了打箭菊肝损伤保护作用的药效物质基础及其作用机理。