葡萄渣单宁对多浪羊瘤胃和十二指肠蛋白质代谢的影响机理研究

The effect of condensed tannins on suppression of protein degradation bacteria differed according to their varieties. Supplementation of grape residue can improve the efficiency of dietary protein and further alter quality and quantity of amino acid entering duodenum of ruminants. This study therefore aimed to investigate the effect of condensed tannin in grape residue on rumen fermentation parameters, microbial protein synthesis, and duodenal amino acid profiles in Duolang sheep, by conducting digestibility trial and in vitro simulation trial, and using PCR/DGGE, real time PCR, as well as non isotope dual marker systems, to determine the optimum amount of grape residue supplemented in sheep feed, illustrate the effect of dietary tannin on duodenal absorption of microbial and feed protein, and finally to improve feed development and solve the problem of feed shortage in Xinjiang province.

缩合单宁对瘤胃蛋白降解菌的抑制程度因缩合单宁的种类不同而有较大的差异，其适量添加至反刍动物日粮中可提高饲料蛋白质利用率，进而改变进入小肠的氨基酸数量和质量。本项目以葡萄渣缩合单宁为研究对象，以多浪羊为实验动物，通过饲养实验、体外模拟消化实验、以及PCR/DGGE、Real-time PCR、非同位素双标记法等研究技术，探讨葡萄渣单宁对瘤胃内环境参数、瘤胃蛋白质代谢菌及小肠氨基酸模式的影响，确定葡萄渣在羊饲料中的适宜添加量，为单宁对瘤胃微生物、饲料蛋白以及十二指肠氮素消化吸收的影响机理提供理论依据。同时还可以为新疆葡萄渣资源的开发利用，解决粗饲料短缺，促进区域畜牧业经济发展提供科学依据。

本项目研究了葡萄渣单宁对多浪羊瘤胃和十二指肠蛋白质代谢的影响机理。研究共完成5个方面的内容，具体如下：. 实验一 添加不同比例葡萄籽对多浪羊瘤胃发酵指标和瘤胃饲料降解率的影响.结果显示，添加不同比例的葡萄籽后，全价饲料的48 h产气量、发酵液pH、氨态氮和菌体蛋白浓度均发生不同程度的变化。通过本实验，初步摸明了葡萄籽在绵羊日粮中的适宜添加比例，为动物实验的开展奠定了基础。. 实验二 饲粮中添加不同比例葡萄籽对多浪羊营养物质和能量消化代谢及血液生化指标和抗氧化能力的影响.结果表明，4%~12%的葡萄籽日粮对营养物质总体消化率和能量代谢无显著影响，但16%的葡萄籽日粮可降低DM、OM、NDF、CP表观消化率和氮存留率。日粮中添加12%~16%葡萄籽，实验羊机体抗氧化能力得以提升，但白细胞、中性粒细胞数目已达正常绵羊相应指标上限，存在发生炎症的风险。本部分得到的结果为开展饲养实验厘清了方向。. 实验三 日粮中添加不同比例葡萄籽对多浪羊瘤胃细菌和真菌菌群结构的影响.结果显示，饲粮中添加葡萄籽提高了瘤胃pH和MCP含量，对NH3-N无显著影响；随着葡萄籽添加量的增加，TVFA含量减少，乙/丙酸下降，发酵类型向丙酸型发酵转变；未改变瘤胃门、属水平细菌丰度。5个添加葡萄籽添加水平的日粮中，多浪羊瘤胃真菌的优势菌门为新丽鞭毛菌门和子囊菌门；真菌属水平上的优势菌为厌氧鞭菌属为厌氧鞭菌属、瘤胃壶菌属、未注释粪壳菌纲、枝孢属、未注释肉坐菌目、支顶孢菌属、未注释真菌、阶菌属、曲霉属。. 实验四 日粮中添加不同比例葡萄籽对多浪羊肠道细菌菌群结构的影响.结果显示，门水平优势菌门为厚壁菌门与放线菌门，Aeriscardovia为第一优势菌群。日粮中添加不同比例葡萄籽不影响多浪羊肠道细菌多样性，但影响部分菌群丰度。.由此可见，多浪羊日粮中添加不同比例葡萄籽，会不同程度影响瘤胃和小肠菌群，进而影响营养物质的消化吸收和代谢。综合得出，绵羊日粮中葡萄籽的适宜添加范围为8%~12%。