ERRF对雌激素受体功能的调控和对乳腺上皮细胞增殖、分化及癌变调节的作用机制研究

ERRF is identified as a novel estrogen receptor α(ER)-related nuclear factor in our last finished NNSFC project. In this application, we aim to study:(1) Cross-regulation between ERRF and ERα,(2) Explore the ERRF fuction in the estrogen-ER pathway. Especially, we know that Whereas estrogen-ER signaling plays an important role in breast cancer growth, it is also necessary for the differentiation of normal breast epithelial cells. Therefore, we will try to answer the question,"Is the ERRF-mediated the ER functional conversion occurs during the carcinogenesis?" Moreover, we will reveal the ERRF-regulated mammary epithelial cell proliferation and differentiation in vivo.(3)Study the correlation between ERRF expression and the drug sensitivity of endocrine therapeutic agents for breast cancer. In this part, we will reveal that the molecular mechanism the altered expression and/or modification of several growth factor receptors and downstream siginaling molecules regulate the expressionof ERRF, And reveal the relationship between ERRF expression and antiestrogen resistance.

ERRF是我们在上个国家自然科学基金资助项目中发现的一个新的雌激素受体相关因子。本项目拟计划接着研究以下内容：（1）研究ERRF与ERα之间的表达调控关系与机制；（2）探讨ERRF在ERα介导的信号通路中的功能，其中重点分析在肿瘤发生过程中，ERRF是否为介导ERα功能由促分化逆转为促增殖的调节分子，另外，重点分析ERRF在体内对乳腺上皮细胞增殖和分化的调节作用；（3）研究ERRF与抗雌激素的内分泌治疗药物的敏感性的关系，重点研究ERRF的表达与他莫昔芬耐药之间的关系，这是因为在我们的前期结果中发现在ER阳性和Her2阳性的肿瘤中，ERRF的表达低且病人预后差。对以上内容的研究将有助于全面深入理解在肿瘤发生时estrogen-ER信号通路发挥促癌功能的机制，在ER阴性的肿瘤中，ERRF不表达对于抗雌激素的内分泌治疗药物的临床应用也具有重要的指导意义。

我们已经发表的分子病理学研究工作中首次发现基因ERRF在乳腺癌发生过程中发挥一定的作用。在本项目的支持下，我们初步探索了ERRF的作用机制。.在这项研究中主要探索了：1）PI3K/Akt信号通路对ERRF表达的影响; 雌激素及其受体E2-ER信号通路变化对ERRF表达的影响；2）ERRF的表达对雌激素及其受体E2-ER信号通路的影响；3）ERRF的表达对雌激素及其受体E2-ER信号通路的影响；4）酵母双杂交筛选ERRF相互作用蛋白；5）发现与ERRF和ER相关的MicroRNA。初步的结果显示PI3K/Akt抑制剂LY294,002能够显著抑制ERRF在T-47D中的表达，而PD98059和SB431542能够上调ERRF的表达，雌激素受体相关药物Tamoxifen和ICI182, 780能明显上调ERRF在T-47D细胞系中的表达。当在T-47D细胞系中敲除ERRF，发现不能够下调ER mRNA水平的表达，但是能够显著的降低ER蛋白水平的表达。通过酵母双杂交共获得7个潜在的与ERRF相互作用的蛋白。如ZNF350和RNF2。进一步的，还发现了一些重要的miRs发生了显著的改变，等等。这些发现对探讨ERRF在乳腺癌中发挥功能的机制提供很好的研究基础。