miR-423在乳腺癌恶性转移过程中的作用和调控机制研究

Metastasis is a complex process that requires cancer cells to escape from the primary tumor, survive in the circulation, and adapt to a new environment at the distant sites for survival and proliferation. Each of these processes, cancer cells closely interact with their surrounding microenvironment. Indeed, it is widely accepted that the metastasis potential of cancer cells is determined by their intrinsic and extrinsic properties and the role of miRs has been implicated in regulating both to promote metastasis. Our preliminary study showed that miR-423 is highly expressed in the metastatic breast tissues. Further analysis showed that miR-423 altered the intrinsic properties of cancer cells such as cell proliferation and migration. And furthermore, our preliminary data suggested that it actively involved in the formation of tumor associated angiogenesis. In this application we aim to: 1)determine the molecular mechanism of miR-423 in the regulation of cancer cell proliferation and migration; 2)study the function of miR-423 in xenograted SCID mice; 3)determined the molecular mechanism of miR-423 in the regulation of tumor asscociated angiogenesis; 4)evaluate its potential as a diagnostic biomaker for breast cancer metastasis.

肿瘤是否转移是由肿瘤细胞本身遗传特征以及其肿瘤微环境的特点来共同决定的。近年来研究发现一些miRNAs既有调控肿瘤细胞生物学行为的功能又能通过调节肿瘤微环境的特点来促进肿瘤的恶性转移。我们最近发现在发生转移的乳腺癌病人的肿瘤组织中miR-423高表达，在体外细胞实验中该miR不仅能促进肿瘤细胞的增殖和迁移，而且能分泌到细胞培养液中，并且在体外细胞实验中该miR能显著促进血管内皮细胞的迁移和成管。在本项申请中，申请者将确定miR-423促进肿瘤细胞增殖和迁移的分子机制；利用SCID小鼠来研究miR-423在肿瘤转移中的作用；在临床样本中探究miR-423及其靶基因的表达情况。上述实验，将为miR-423在人类乳腺癌模型中作为治疗靶点，早期诊断的标志物及预后判断的可能性提供实验依据。

肿瘤的发生发展和恶性转移主要是由肿瘤细胞本身遗传特征以及肿瘤微环境的特点来决定的。近年来发现一些miRNAs既有调节肿瘤细胞生物学行为的功能，又能调节肿瘤微环境的特点来促进肿瘤的恶性进展。在本项目中，主要的研究内容是，（1）阐明miR-423的遗传特点。包括研究miR-423内的rs6505162的等位基因与乳腺肿瘤患病风险之间的关系，发现rs6505162位点的体细胞突变规律，并结合临床病理参数分析体细胞突变发生与否与这些参数之间的统计的相关。(2)阐明miR-423的表达规律，并在临床样本中分析miR-423的表达水平与病理参数之间的关系。（3）阐明miR-423是否促进肿瘤细胞的增殖，是否促进细胞的恶性转化，是否促进肿瘤细胞迁移。（4）发现调节miR-423表达的分子机制。.结果：（1）发现miR-423内的rs6505162不同等位基因与肿瘤病理参数之间没有显著的相关，但是rs6505162位点存在者比较高频的体细胞突变。而且该体细胞的突变发生显著的与细胞增殖的分子标记PCNA的表达水平正相关。（2）在肿瘤组织中miR-423表达显著上调，而且miR-423-3p与miR-423-5p的表达出现显著的线性正相关关系。并且其表达水平与多项病理指标间存在显著的相关关系。（3）我们发现rs6506162的A等位基因会促进成熟miR-423的表达量显著的高于G等位基因的。但是在pre-miR水平没有显著的差异。（4）miR-423的高表达会促进MCF-10A的恶性转化，会促进肿瘤细胞的增殖与迁移。（5）我们发现ANKLE2能促进miR-423分泌到细胞外。（6）过表达的miR-423促进血管内皮细胞的迁移和成管。（7）我们发现HER2的过表达能促进miR-423的表达，而且miR-423能靶向PR等。.科学意义：阐明miR-423的功能将有助于我们进一步深入了解肿瘤发生发展的机制，以及其对肿瘤微环境的影响，从而有助于对肿瘤，尤其是对乳腺癌的诊治提供更多的背景资料。