OCT4通过促炎性因子IL-17A介导的信号通路调节宫颈癌侵袭转移的机制研究

Cervical cancer metastasis has become a threat to middle-aged women in our country. The characteristics of tumor cells and tumor inflammatory microenvironment are important mechanism of tumor metastasis. The existing results show that the expression of OCT4 and IL-17A was up-regulated in cervical carcinoma, and was correlated with cervical cancer metastasis. Both OCT4 and IL-17A could up-regulate the expression of Matrix metalloproteinase and promote cervical cancer cell invasion and metastasis. IL-17A promotes the migration and invasiveness of cervical cancer cells by activating the p38/NF-kB signal pathway. However, the study of the role of OCT4 on the cervical cancer metastasis has not been reported. The project intends to apply cervical cancer cell model to explore the effects of OCT4 on cervical cancer metastasis, and reveal new molecular mechanisms of OCT4 mediated cervical cancer metastasis through co-localization by immunofluorescence, Luciferase assay and chromatin immunoprecipitation techniques and so on. Based on research trends at home and abroad and preliminary work, we proposed a new vision of human cervical cancer metastasis by by which OCT4 trans-activates the expression of IL-17A, reconstruct tumor microenvironment, conversely activate p38/NF-kB signaling pathway. The successful implementation of this project is expected to provide new molecular targets for the treatment of cervical cancer metastasis, which has important scientific significance and application value.

宫颈癌转移严重威胁我国中老年女性的生命健康。肿瘤细胞的本质和炎性微环境是肿瘤转移的的重要机制。前期结果显示：OCT4和IL-17A 在宫颈癌中是上调的，并与宫颈癌转移相关。OCT4和IL-17A均能上调基质金属蛋白酶表达，并促进宫颈癌侵袭转移。IL-17A通过p38/NF-kB信号途径促进宫颈癌侵袭转移。但OCT4在宫颈癌转移方面的研究尚未见报道。本项目拟应用宫颈癌细胞模型，探讨OCT4对宫颈癌转移的作用，并通过免疫荧光共定位、Luciferase实验、染色质免疫共沉淀等技术揭示OCT4调节宫颈癌转移的分子机制。基于国内外研究趋势和前期工作，提出OCT4通过转录IL-17A重构肿瘤微环境，反过来激活细胞p38/NF-kB信号途径，并促进宫颈癌转移的新设想。本课题的成功实施有望成为治疗宫颈癌转移提供新的分子靶点，具有重要科学意义和应用价值。

宫颈癌转移严重威胁我国中老年女性的生命健康。肿瘤细胞的本质和炎性微环境是肿瘤转移的重要机制。OCT4作为关键的干细胞核转录因子，在多种肿瘤中高表达，并促进了肿瘤的进展。但OCT4在宫颈癌转移方面的研究尚未见报道。本项目应用宫颈癌细胞模型，探讨OCT4对宫颈癌转移的作用，并通过免疫染色、Luciferase实验、染色质免疫共沉淀等技术揭示OCT4调节宫颈癌转移的分子机制。研究内容：本课题采用免疫组织化学技术对宫颈癌组织样本展开研究，明确 OCT4在宫颈癌组织中的细胞定位、表达情况以及与各临床参数间的相互关系。通过划痕、Transwell 小室实验分析 OCT4 对宫颈癌细胞的迁移能力和侵袭能力的影响。应用real-time PCR检测宫颈癌细胞中基质金属蛋白酶MMPs 及IL-17A，P38信号通路相关基因mRNA表达，分析OCT4 对宫颈癌细胞MMPs,IL-17A，P38信号通路相关基因表达的影响。通过ELISA、Western blot的方法检测IL-17A蛋白的表达。利用荧光素酶报告基因实验及染色质免疫共沉淀明确OCT4对IL-17A的作用分子机制。研究结果：免疫染色结果显示，OCT4 主要呈细胞核表达。OCT4的表达与患者年龄、临床分期、肿瘤大小无相关性；然而OCT4的表达与患者肿瘤分化程度、病灶浸润深度和淋巴结转移有相关。划痕实验、Transwell 小室实验提示OCT4促进了宫颈癌细胞的迁移能力、侵袭能力。real-time PCR实验检测了OCT4促进了宫颈癌细胞基质金属蛋白酶MMPs、IL17A。ELISA、Western blot实验结果提示OCT4促进了IL-17A蛋白的表达。荧光素酶报告基因和染色质免疫共沉淀ChIP结果表明，OCT4能生理性的结合IL-17A调节原件，从而转录激活其表达。干扰IL-17A以及抑制P38/NF-kB信号通路后能够逆OCT4引起的促宫颈癌细胞的侵袭作用。本项目以课题组长期研究方向OCT4为主线，连接宫颈癌研究领域中肿瘤转移分子调节机制的关键问题，针对促炎性因子IL-17A调节的研究，从全新角度阐述OCT4/IL-17A/P38调节的信号通路在宫颈癌转移中的作用，为探索宫颈癌进展的分子机制补充新的理论和实验依据。