体外构建的组织工程角膜内皮细胞膜片在灵长类模型上移植的临床前评价

Corneal endothelial cells play very important roles in maintaining corneal normal functions.When the numbers are below the threshold values, corneal endothelial decompensation will happen.The best therapeutic way is to perform the Descemet Memberane Endothelial Keratoplasty(DMEK).But the limited donors are insufficent for the clinical application. In this experiment, we will operate DMEK in a primate model by constructing in vivo corneal endothelial cell sheet in which corneal endothelial cells are seeded on porcine DMs.Our aims are to overcome the deficiency of donors, offer supports and clarify the feasibility of tissue engineer corneal endothelial cell sheet in clinic.

角膜内皮细胞对维持角膜的正常厚度和透明性十分重要。人角膜内皮细胞在体内不可再生，一旦损伤,细胞数量会明显降低，严重者引起角膜内皮失代偿。角膜后弹力层内皮移植是治疗此病的最佳方法,但因供体受限,无法满足临床的需求。本实验选择最接近人的灵长类动物-猴为研究对象，以猪的角膜后弹力层为载体，猴的角膜内皮细胞为种子细胞，体外构建猴同种异体角膜内皮植片，通过角膜后弹力层移植术（DMEK）制备手术模型，探索手术方式、评价术后疗效。本课题旨在明确组织工程角膜内皮细胞植片用于临床治疗角膜内皮病变的可行性，为临床开展这项手术奠定基础。

人角膜内皮细胞在体内不可再生，损伤严重可引起角膜内皮失代偿。目前，角膜内皮移植术已成为治疗角膜内皮病变的最佳术式，但如何提供具有充足角膜内皮数量的供体材料是临床面临的问题。本课题通过体外培养猴角膜内皮细胞，以猪角膜后弹力层为载体，构建组织工程角膜内皮细胞膜片，并检测其形态和功能。对构建出的组织工程膜片行DMEK移植入同种异体的猕猴受体，行疗效评价。结果表明构建出的组织工程角膜内皮细胞膜片与猴在体内皮细胞具有相似的六边形形态，免疫荧光见角膜内皮细胞NSE、Na+-K+-ATP酶、ZO-1呈阳性表达，扫描电镜结果显示细胞间紧密连接，细胞与后弹力层紧密贴附。移植后排斥率低，使内皮损伤的角膜恢复透明，并在体内长时间保持功能。这一成果有望解决角膜供体来源不足的问题，为未来临床角膜内皮疾病的治疗开辟新的途径。