HMGB1在侵袭性白念珠菌感染中的作用及其释放机制

侵袭性白念珠菌感染因发病的隐匿性和耐药菌株的出现，已成为临床面临的棘手难题。白念珠菌感染后通过激活机体固有免疫系统，免疫细胞过度释放细胞因子导致炎症反应级联放大和失控可能是侵袭性白念珠菌感染所致多器官损伤和病人死亡的主要原因。本课题组在对脓毒症促炎细胞因子反应网络的关键因子- - HMGB1的研究中发现，侵袭性白念珠菌感染患者血中HMGB1水平明显增高，因此，我们推测作为脓毒症晚期重要的致死性炎性介质，HMGB1同样会在白念珠菌性脓毒症中发挥致死效应。本课题拟从临床病人、体外和体内试验三方面探索HMGB1在白念珠菌性脓毒症中的作用、白念珠菌感染时机体释放HMGB1的信号传导通路，并采用miRNAs基因芯片技术和 生物信息学分析方法筛选出白念珠菌感染时可能调控HMGB1表达的miRNAs，为侵袭性白念珠菌感染的治疗寻找新的突破口。

侵袭性白念珠菌感染因发病的隐匿性和耐药菌株的出现，已成为临床面临的棘手难题。本课题从临床病人、体外和体内试验三方面探索脓毒症促炎细胞因子反应网络中心环节的关键因子HMGB1在白念珠菌性脓毒症中所起作用、机体释放HMGB1的信号传导通路，并采用microRNA基因芯片技术和生物信息学分析方法筛选出白念珠菌感染时可能调控HMGB1表达的microRNA。临床试验结果显示在蛋白水平重度脓毒症伴白念珠菌感染患者的HMGB1表达明显高于不伴真菌感染的重度脓毒症患者，而在mRNA水平没有看到这种现象。体外试验结果显示白念珠菌刺激可诱导巨噬细胞HMGB1的表达和释放增加，并维持在较高水平；白念珠菌刺激后HMGB1发生从胞核到胞浆的转位； 白念珠菌通过TLR4/MD2→MyD88→TAK1→p38MAPK→NF-κB这一信号通路诱导了HMGB1的表达和释放。体外试验成功建立了侵袭性白念珠菌感染小鼠模型，检测到实验小鼠肝、肾功明显受损及C-反应蛋白明显升高；外周血、肝、肺、肾组织HMGB1的表达量均明显增加。在microRNA基因芯片试验中筛选到了最可能调控HMGB1的mmu-miR-7042-5p和mmu-miR-8117这两个microRNA，并对其进行了基因芯片差异性和与靶基因HMGB1相结合情况的验证，结果显示，mmu-miR-8117和mmu-miR-7042-5p能够特异地结合HMGB1基因，在真菌性脓毒症中，对HMGB1基因的表达起着重要的负调控作用。. 本课题分析了HMGB1的表达水平与疾病严重程度的关系，探索了HMGB1对白念珠菌性脓毒症病人预后的影响，为临床治疗提供了理论依据。通过细胞试验探讨了白念珠菌介导的巨噬细胞HMGB1表达和释放的规律及其分子机制，为临床可能通过抑制HMGB1表达和释放从而有效治疗侵袭性白念珠菌感染提供新的思路和新的分子靶点。采用microRNA基因芯片技术筛选到了在侵袭性白念珠菌感染中可能调控HMGB1表达和释放的microRNA，可能为侵袭性白念珠菌感染的治疗找到了新的突破口。因此该研究具有很重要的理论和实际意义。. 本项目共培养研究生5名，发表论文10篇，其中SCI收录论文3篇。