硫氧还蛋白的硝基化修饰对衰老大鼠心肌细胞的促凋亡作用

细胞凋亡在衰老心脏心肌细胞丢失中的作用越来越受到关注，但作用机制不明。我们的前期研究提示，硫氧还蛋白（Trx）系统硝基化失活可能是衰老心脏心肌细胞凋亡的重要机制。本研究运用TUNEL、DNAladder形成和微量酶活性检测等方法观察衰老大鼠心肌细胞凋亡发生情况及主要信号转导途径；运用免疫组化、免疫印迹等方法观察大鼠心肌组织Trx系统表达、活性、硝基化和亚硝基化水平随年龄的变化情况，以及这些变化与心肌细胞凋亡的关系。通过腹腔植入渗透泵给予广谱caspase抑制剂观察心肌细胞凋亡在老年大鼠心功能、动物存活寿命变化中的作用，通过外源性给予亚硝基化Trx观察蛋白质硝基化和亚硝基化对这种作用的影响。分别检测不同年龄大鼠血清和心肌组织中Trx浓度，明确二者之间随年龄变化的相关性。从分子、细胞和整体水平阐明心肌老化的机制，加深对衰老理解，为延缓衰老和防治衰老相关疾病提供理论依据。