发菜生长发育特异蛋白基因的克隆及功能研究

发菜是一种陆生固氮蓝藻，具有重要的生态及经济价值。但由于对其个体生长发育的分子机制及在极端环境中的适应机制尚未探明，发菜的人工培养一直没有突破性进展。本研究采用双向电泳技术和质谱技术对发菜生长发育过程中的蛋白质组分进行分析，分离和纯化发菜生长发育的特异蛋白，并进行N端氨基酸测序，依此合成简并引物，以发菜mRNA反转录的cDNA为模板，应用RACE方法扩增特异蛋白相关基因的cDNA全长，并对特异蛋白基因的cDNA进行测序及序列分析，构建特异蛋白基因反义表达载体导入人工培养的发菜细胞，研究其在细胞生长发育中的生物学功能。通过研究获得发菜生长发育过程中蛋白质组分的变化信息，得到特异蛋白基因并明确其功能，为揭示发菜细胞增殖与藻体生长的分子本质，阐明发菜生长发育过程中从基因到性状表达的规律奠定基础，并为利用基因工程技术改良发菜或利用抗逆性特异基因改良其他植物尤其是农作物提供思路。