洛伐他汀对NMDA受体功能调节的机制

由于NMDA受体（NR）介导的兴奋性毒性损害在急性脑卒中和慢性神经退行性疾病中的中心作用，减轻兴奋性毒性损害成为神经保护的基本策略。我们先前研究表明，洛伐他汀慢性预处理对NMDA诱导的兴奋性损害的神经元有保护作用，这与他汀降低胆固醇的时程一致。脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，被认为参与某些膜受体和信号转导分子的亚细胞定位。像其它功能性膜受体一样，NMDA受体的功能调节取决于其亚细胞定位。他汀能显著减少脂筏介导的膜蛋白内吞。因此，研究他汀对NMDA受体的亚细胞定位的调节将有助于理解其神经保护机制。本课题拟从多个角度，研究洛伐他汀预处理对兴奋性毒性损害过程中NR1、NR2A、NR2B等的亚细胞定位（蛋白水平、表面表达、胞内运输、蛋白降解等）的影响。本研究将有助于理解洛伐他汀对兴奋性毒性损害的神经保护机制，为急性和慢性脑损害的防治寻找新的靶点，为中枢神经系统疾病的治疗提供理论支持。

由于 NMDA 受体（NR）介导的兴奋性毒性损害在急性脑卒中和慢性神经退行性疾病中的中心作用，减轻兴奋性毒性损害成为神经保护的基本策略。NMDA受体（NR）是一种配体门控离子型谷氨酸受体，其介导的神经兴奋性在急性和慢性脑损害中起关键作用。其中NR1为最基本的功能单位，NR2为重要的调节亚单位。NR2A/NR2B 是NR2的主要亚单位。脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，被认为参与某些膜受体和信号转导分子的亚细胞定位。像其它功能性膜受体一样，NMDA 受体的功能调节取决于其亚细胞定位。他汀能显著减少脂筏介导的膜蛋白内吞。随着研究的深入, 他汀的神经保护作用日益受到重视。本研究在洛伐他汀对NMDA诱导的兴奋性毒性损害具有明显的神经保护作用研究基础上，选用孕期17d的SD大鼠，取皮质神经元接种培养，通过台盼蓝排除实验评估细胞活力、免疫荧光细胞化学技术测定观察神经元形态和细胞定位、生物素化检测细胞表面受体、NR2B 翻转实验评估蛋白降解、蛋白免疫印迹法测定蛋白水平等手段进一步探讨洛伐他汀对NMDA诱导的兴奋性毒性损害的神经保护机制。研究表明，洛伐他汀通过影响NMDA 亚单位NR2B的细胞内吞作用和胞内降解选择性调节NMDA 亚单位NR2B 表面表达；洛伐他汀抑制NMDA 诱导的Calpain 激活，阻断Calpain对其底物NR2B、Cdk5/P25的酶切，进而减轻其神经毒性。研究结果有助于更好地理解他汀在神经幸存通路中的地位，为急性和慢性脑损害的防治寻找新的靶点。课题组按照研究计划基本如期完成了该课题的研究工作。