组蛋白去乙酰化酶抑制剂（TSA、SAHA、MCP30）对苯致TOPOⅡα基因失活的造血干细胞损伤的逆转作用

苯是职业致癌物，工业应用广泛，苯污染严重，苯接触从业人员多，苯诱发的造血系统疾病发病率高，苯污染具有显著的地域性。本课题组研究苯诱导的造血损伤， 证实苯及其代谢物改变TOPⅡα启动子调控因子的组蛋白乙酰化修饰为主要的苯血液毒性。本研究的假说是乙酰化酶抑制剂（HDACI）可以逆转TOPⅡα启动子调控因子乙酰化修饰达到防治苯的造血损伤。本项目利用我们独创的中药苦瓜蛋白MCP30防治苯的造血损伤,并比较国外上市的HDACI伏立诺他（SAHA）或已进入临床前试验阶段曲古菌素 A（TSA）的效价。采用体外CD34+细胞培养，体内苯中毒再障小鼠模型的解救模型及临床苯中毒病人骨髓CD34+细胞，采用ChIP、comet assay、Western Blot 、Q-PCR、流式细胞术等全面评估HDACI干预苯对造血干细胞损伤的逆转作用，为苯中毒导致血液系统疾病的防治提供创新的思路。

苯在工业中应用广泛，其能诱发苯接触从业人员造血系统疾病，导致严重的健康和社会问题。本项目主要探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACI）体内干预是否逆转苯所致的血液学毒性。我们构建了苯吸入的再障模型，腹腔注射两个HDACI MCP30和曲古菌素A（TSA）。结果显示MCP30与TSA一样，均能显著减少苯中毒症状，其机制是逆转苯所致的TopoⅡα表达和活性降低，通过增加TopoⅡα启动子组蛋白乙酰化和改变TopoⅡα启动子调控因子表达。此外，我们发现了苯代谢产物氢琨通过Akt/GSK-3β/β-catenin途径诱导骨髓造血细胞凋亡，降低造血细胞活性，胰岛素生长因子1和氯化锂均能减少氢琨导致的细胞活性降低和凋亡。我们也发现了苯及其代谢产物氢琨主要通过抑制乙酰化酶P300促进自噬导致血液学毒性，MAP30通过增加P300表达和活性来抑制自噬从而改善血液学毒性。总的来说，本项目阐明了HDACI干预能逆转苯对造血干细胞的损伤，同时也阐明了自噬和Akt/GSK-3β/β-catenin途径也参与了苯及其代谢产物所致的血液毒性，可为苯中毒导致血液系统疾病的防治提供一些新的治疗靶点和药物。