HMF调节Hedgehog信号转导的分子机制研究

Hedgehog(Hh)信号通路在动物发育过程中起重要作用。Hh信号通路的失调可导致发育的缺陷及肿瘤的发生。 Hh 通路活性的调节是多层次的,通路的转录因子Cubitus interruptus (Ci)是一个重要的调节靶点.我们发现了一新基因,命名为hmf,是维持Hh通路正常活性必需的，hmf RNAi导致Ci蛋白水平显著下调，由此导致Hh 通路活性下降,HMF调节Hh通路机制不清楚。 本项目以果蝇为模式生物,研究HMF 调节Hh通路的分子机制。该研究具有重要理论意义,可加深我们对Hh 通路调节的认识;同时由于Hh不正常下调可导致新生儿前脑无裂畸形（HPE），研究HMF维持Hh通路的机制有助于揭示hmf 基因突变与HPE是否有关，如有关则该研究对临床工作中针对性治疗具有重大指导意义。

Hedgehog(Hh)信号通路在动物发育过程中起重要作用。Hh信号通路的失调可导致发育的缺陷及肿瘤的发生。 Hh 通路活性的调节是多层次的,通路的转录因子Cubitus interruptus (Ci)是一个重要的调节靶点.我们发现了hmf(Hedgehog signaling maintaining factor,HMF)是维持Hh通路正常活性必需的，hmf RNAi导致Ci蛋白水平显著下调，由此导致Hh 通路活性下降,HMF调节Hh通路机制不清楚。 本项目以果蝇为模式生物,研究HMF 调节Hh通路的分子机制。取得成果如下：（1）hmf RNAi敲降hmf，下调Ci水平，但Cipromoter-LacZ水平未受影响，表明Ci下调为蛋白水平,Ci转录水平未发生改变。（2）Hmf包含BTB结构域，BTB结构域通常介导与Cul3 E3连接酶结合。我们免疫共沉淀（IP）实验结果表明Hmf可与Cul3结合形成复合物。（3）IP显示HMF与HIB 结合形成复合物。（4）Cul3-HMF复合物可以下调HIB蛋白水平。（5）Cul3行使E3连接酶功能，泛素化HIB导致其通过26S蛋白酶体降解，最终影响Ci蛋白水平导致Hh通路活性变化。进一步研究需阐明HMF识别HIB上什么degron，并通过什么位点赖氨酸（K）泛素化介导HIB降解的。该研究具有重要理论意义,可加深我们对Hh 通路调节的认识;同时该研究对临床工作中针对性治疗具有重要指导意义。