乳腺癌细胞中凝溶胶蛋白下调HER-2的分子机制及在TAM治疗抵抗中意义的研究

三苯氧胺（TAM）是雌激素受体ERα阳性乳腺癌的常用内分泌治疗药物，但药物抵抗在应用中亟待解决。HER-2是造成内分泌治疗药物TAM产生抵抗的关键因素，目前针对HER-2的疗法主要靶向其信号途径。已发现HER-2是ERα的靶基因，表达水平受ERα相互作用蛋白的调节。前期研究发现，凝溶胶蛋白（GSN）是潜在的通过ERα转录调控途径抑制HER-2表达的ERα相互作用蛋白。我们拟通过一系列分子生物学及细胞学研究手段证明：GSN通过竞争共激活因子与ERα的结合下调HER-2表达，并逆转HER-2所致TAM抵抗。本研究在生物学调控的水平，从源头对HER-2的负性调节进行了深入的研究，是对TAM治疗抵抗研究的重要补充，不但从分子机制上能阐明GSN在乳腺癌病理进程中的重要作用及意义，也为临床乳腺癌治疗中TAM抵抗的研究指出了新的方向，为进一步抑癌药物的研制与开发提供了实验室依据。

项目拟对乳腺癌细胞中凝溶胶蛋白（gelsolin，GSN）下调人表皮生长因子受体2（Her2）的机制及其参与TAM治疗抵抗的意义进行研究。项目组首先发现了GSN能作为雌激素受体α（ERα）相互作用蛋白发挥作用，并进一步研究了GSN对ERα阳性、Her2过表达乳腺癌细胞MCF7/Her2生长的作用。通过构建GSN的真核表达载体，并稳定转染MCF7/Her2细胞，发现MCF7/Her2稳定过表达GSN后，细胞形态改变且增殖及迁移、侵袭能力明显低于对照细胞；发现Her2表达下降，TIMP3的表达上调，而雌激素导致的MCF7/Her2细胞ERK活化被逆转，即GSN对ERα的非基因组活性有明显的抑制作用，并通过下调ERK的活化及上调TIMP3的表达，抑制乳腺癌细胞MCF7/Her2增殖及迁移/侵袭作用..基于实验经费及条件所限，我们几个重要的推断未能得到充分的证实： 1. GSN在雌激素受体启动子上募集的直接证据。2. TAM抵抗乳腺癌细胞株中GSN表达上调。3. 在对乳腺癌病人病理切片进行研究的过程中，因实验手段的限制，未见到GSN和Her2阳性的明确相关性。我们希望后续的研究能继续进行探索。.虽然本项目的研究未能完全证实我们的科学假设，但就目前的实验结果来看，我们亦取得重要的科学结论，对相关研究领域的研究具有重要的意义。1. 证实了GSN和ER的相互作用。2. 首次证实了GSN可以下调Her2的表达。3. 证实了GSN作为一种肿瘤的抑制作用物，在Her2过表达乳腺癌细胞中，GSN通过下调Her2的表达，进而上调TIMP3的表达，逆转雌激素导致的过强的非基因组活性，这可能是GSN抑制乳腺癌的一种新的机制。